Tlr4mut小鼠自發(fā)性肺氣腫的免疫機制及治療干預(yù).pdf

1、慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是全球?qū)е滤劳龅牡谖宕蟛∫?是一種由于小氣道阻塞、氣流受限導(dǎo)致呼吸困難為特征的慢性進(jìn)行性疾病,其主要病理改變包括肺氣腫、間質(zhì)纖維化和炎癥。其中肺氣腫和間質(zhì)纖維化一直被認(rèn)為是不可逆的器質(zhì)性改變。肺氣腫主要表現(xiàn)為肺部終末細(xì)支氣管遠(yuǎn)端氣腔出現(xiàn)持久性異常擴張,并伴有肺泡壁和細(xì)支氣管的破壞。研究表明,肺氣腫發(fā)病機制主要與蛋白酶/抗蛋白酶失衡、氧

2、化應(yīng)激、細(xì)胞凋亡和炎癥有關(guān)。Toll樣受體(Toll-like receptor,TLR)作為先天性免疫系統(tǒng)溝通獲得性免疫系統(tǒng)的重要橋梁,可決定獲得性免疫系統(tǒng)中Th1、Th2、Treg、Th17細(xì)胞發(fā)育方向。除TLR外,C型凝集素dectin-1介導(dǎo)的針對白色念珠菌的免疫識別可誘導(dǎo)幼稚型T細(xì)胞向Th17細(xì)胞分化。研究表明,TLR4突變能夠?qū)е滦∈蟪霈F(xiàn)自發(fā)性肺氣腫,但Th17在TLR4所致自發(fā)性肺氣腫發(fā)病過程中的作用和機制尚不清楚。

3、>　　 本研究利用Tlr4mut小鼠自發(fā)性肺氣腫模型,采用流式細(xì)胞儀檢測TLR4突變所致小鼠肺臟Th17細(xì)胞改變,采用PCR檢測與影響Th17分化、增殖的細(xì)胞因子IL-23和TGFβ1 mRNA表達(dá),采用Western Blot和EMSA檢測Smad3的表達(dá)與活性,采用Western Blot檢測與IL-17相關(guān)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)MAPKs-NFκB的改變。結(jié)果表明,TLR4突變導(dǎo)致幼稚T細(xì)胞向Th17的極化且隨年齡增長發(fā)生動態(tài)變化,3月齡

4、時出現(xiàn)明顯下降；IL-23的改變與Th17的改變相似,但影響Th17型極化方向的TGF-β1水平無明顯改變,Smad3表達(dá)與活性在3月齡增加。TLR4突變還可導(dǎo)致p38、JNK的磷酸化水平在1月齡顯著下降,磷酸化I-κB和NF-κB水平在15天齡升高,隨后逐漸恢復(fù)。NAC增加Tlr4mut小鼠肺組織IL-23表達(dá)和Th17細(xì)胞浸潤,預(yù)防Tlr4mut小鼠自發(fā)性肺氣腫,證明IL-23和Th17細(xì)胞減少與Tlr4mut小鼠自發(fā)性肺氣腫有關(guān)。

5、中藥復(fù)方CFX是一種食用發(fā)酵真菌多糖復(fù)合物,可與模式識別受體如TLRs、dectin—1等結(jié)合,調(diào)節(jié)機體免疫反應(yīng)；CFX還可通過抗氧化作用減輕纖維化腎臟的氧化應(yīng)激損傷,抑制細(xì)胞凋亡。本研究表明中藥復(fù)方CFX能夠抗氧化、減少細(xì)胞凋亡,增加IL-23表達(dá)水平及Th17細(xì)胞浸潤,減輕Tlr4mut小鼠自發(fā)性肺氣腫。
　　 結(jié)論:TLR4突變導(dǎo)致Th17減少和IL-23表達(dá)下調(diào),調(diào)節(jié)MAPKs-NF-κB信號途徑,引起自發(fā)性肺氣腫。NA