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1、、,西北農(nóng)林平杖大學(xué)2007屆攻讀碩士學(xué)位研究生學(xué)位(畢業(yè)j論文柔嫩艾美耳球蟲楊凌株cDNA文庫(kù)的免疫學(xué)篩選及其3—1E基因的克隆與表達(dá)學(xué)科、專業(yè)研究方向研究生指導(dǎo)教師合作指導(dǎo)教師完成時(shí)舊:塑陵置醫(yī)生一j絲赴勤韭蝴iL一摧芏星i:圣杜熬握』芏螋盟紅曼2007印3月蘭一裝ⅫIMMUNoSCREENINGOFcDNAEXPRESSIONLIBRARYOFE勱刃曼足丟4乃酣憶£厶4YLSTRAINANDCLONINGEXPRESSIONOFM
2、AJORANTIGENGENEABSTACTChickencoecidiosisisallimportantaviandiseasewhichseriouslyharmsthepoutryindustryItwascausedbyvariousEimeriasppparasitizedinintestinalmucosalepitheliawhicharecharacterizedwithentericpathologicallesio
3、nsAmongvariousEimeriaspp。,Etenellawhichca髑escaccalcoccidiosisishighlypathogenicPresengtlythecontrolofcoccidiosischieflydependsuponprophylacticchemotherapywimanticoeeidialdrugsHowevertheemergenceofdrugresistanceincoceidia
4、isagreatproblemwitIImostofthedrugs,whichinduecour跎,limitstheiruseFurthermore,drugorantibioticresidueinthepoultryproductispotentiallyharmfultoconsumersTheselimitationshavenecessitatedthesearchforalternativeEimeriacontrolm
5、easuresAmongtheseveralalternativeEimeriacontrolmeasllrasonlyhostvaccinationagainstEimeriaappearspromisingInthisrcsearch,ourstrategywasscreeningtheconstructedcDNAexpressionlibraryofthesporozoitesbyEtenellaYLstrainsporulat
6、edoocystsbyimmunologicalmethods,cloningandexpressingtheantigengenes,analyzingtheprotectiveimmunityResultsofstudiesdisplayedasfollowing1eDNAexpressionlibraryoftheEtenellaYLstrainsporozoiteswasimmunoscrcenedwithpositiveser
7、aofchickenanti—EtenellaandmbbRanti—EtenellaYLstrainThus3positivecloneswereobtained,onepositiveclonegenewasdesignated,andtheORl:ofthisgeneisconsistedof513nucleotidesencoding170aminoacidsTherewerellighhomologieswithpublish
8、ed31EgeneingenBankComparedwith3IEofEtenellaGSstrainandUS蚰咖thehomologyofnucleotidesacidsequenceofEtenellaYLstrain3IEwere998%and994%respectivelythehomologyofaminoacidencodedwere988%and98_2%,respectivelyAllthoseconfirmedtha
9、tthegenewasanewgeneofEtene//anenewgeneaccessionnumberinGenBankisEF069437anditwasnamedasEimeriatenellastrainYL31E2Theinterestinggeneof31EfloralibrarywasdonedtoexpressionvectorofpGEX4T=1withspecialprimer11∞fusionexpression
10、vectorofpGEX03一lEandwasconstructedthentransformedintoEcoliBL21Thefusionexpressionof31EwasinducedwithIPTGtheexpressionproductwasanalyzedbySDSPAGEmresultsshowedthatthe31EfusionproteinwasexpressedsuccessfullyinBL21mfusionpr
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