2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、雞球蟲病是由艾美耳球蟲寄生于雞腸道所引起的一種危害嚴重的全球性寄生蟲病,給養(yǎng)雞業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。目前控制球蟲病的主要方法包括化學藥物防治和疫苗免疫預(yù)防,但由于這些方法存在安全、價格以及抗藥蟲株出現(xiàn)等問題,迫切需要尋找新的防治手段來控制球蟲病。研制高效安全抗球蟲病基因工程疫苗的關(guān)鍵在于尋找到重要的蟲體抗原基因。 本研究為了研究堆形艾美耳球蟲(Eimeria. Acervulina)早熟株與母株之間基本生物學特性的差異,運用Je

2、ffers創(chuàng)立的艾美耳屬球蟲早熟株選育方法對堆形艾美耳球蟲(E。acervulina)進行了連續(xù)18代的早熟選育,并通過對早熟株與母株的孢子化卵囊大小、繁殖能力、致病性及免疫保護力等指標進行測定,分析了E. acervulina早熟株與母株之間基本生物學特性的差異。 為了進一步從分子水平對E. acervulina早熟株和母株之間的差異進行分析,本研究分別以早熟株和母株孢子化卵囊互為驅(qū)動組和實驗組,利用抑制性消減雜交技術(shù),進行了

3、雙向抑制性消減雜交,構(gòu)建了2個抑制性消減cDNA文庫。隨機從2個cDNA消減文庫中分別挑取50個克隆,經(jīng)PCR鑒定2個消減cDNA文庫的重組率為97%和98%。從每個文庫中隨機挑取50個克隆測序,并進行同源性比較分析,結(jié)果顯示:從早熟株消減文庫中獲得了20個單一有效序列,其中9個單一序列與已知的蛋白同源性很高,主要為堆形艾美耳球蟲絲氨酸蛋白酶抑制劑、表面抗原,剛地弓形蟲假想蛋白、隱孢子蟲假想蛋白、泰勒蟲假想蛋白、弓形蟲聚合酶等。從母株消

4、減文庫中獲得了21個單一有效序列,有7個單一序列與已知的蛋白同源性很高,主要為剛地弓形蟲假想蛋白、瘧原蟲假想蛋白、人類ATP合成酶、鼠類線粒體醛脫氫酶前體等。 根據(jù)序列分析獲得的ESTs,從每個文庫中選擇4個陽性克隆基因,利用Real-time PCR進行分析。結(jié)果顯示從母株消減cDNA文庫中獲得的ESTs,在母株孢子化卵囊中mRNA轉(zhuǎn)錄水平高于早熟株孢子化卵囊,而從早熟株消減cDNA文庫中獲得的ESTs,在早熟株孢子化卵囊中m

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