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1、弱毒苗是應(yīng)用最為廣泛的球蟲(chóng)疫苗,球蟲(chóng)卵囊致弱的方法主要是對(duì)球蟲(chóng)卵囊進(jìn)行冷卻、加熱、超聲、離子輻射等處理,而使之減毒。本試驗(yàn)對(duì)雞E. tenella YL株的母株進(jìn)行不連續(xù)紫外線照射致弱,分離純化后得到減毒株并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了研究,為球蟲(chóng)弱毒苗的研制奠定基礎(chǔ)。試驗(yàn)結(jié)果如下: 1.用波長(zhǎng)2650 A紫外線對(duì)柔嫩艾美耳球蟲(chóng)楊凌株卵囊不連續(xù)照射,時(shí)間分別為10min,20 min,30 min,40 min,50 min和60 mi
2、n,相對(duì)孢子化率分別為94.39%,81.63%,72.96%,53.06%,21.94%和8.16%,說(shuō)明UV作用10 min對(duì)卵囊活力影響不大,隨照射時(shí)間的延長(zhǎng),卵囊的相對(duì)孢子化率明顯下降,長(zhǎng)時(shí)間的UV照射對(duì)卵囊的發(fā)育影響顯著(P<0.05)。采用的UV進(jìn)行不連續(xù)照射球蟲(chóng)卵囊,時(shí)間控制在30 min左右為宜。 2.照射后的卵囊經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后觀察孢子囊清晰可見(jiàn),囊壁內(nèi)有8個(gè)子孢子位于4個(gè)孢子囊內(nèi)。通過(guò)測(cè)定相對(duì)增重率,存活率,病變值
3、及克糞便卵囊數(shù)(OPG),在照射30~40 min的情況下,相對(duì)增重率在70%左右,OPG也維持在較高水平。 3.用單卵囊繁殖的雞E tenella YL減毒株孢子化卵囊經(jīng)口服感染雞,用飽和食鹽水漂浮法能夠收集得到球蟲(chóng)孢子化卵囊,雜質(zhì)少,形態(tài)完整,減毒株卵囊的大小為19.8~21.2×15.5~16.6 μm。 4.E. tenella YL減毒株和母株的潛隱期分別為159 h和168 h,減毒株的潛隱期比母株的縮短了9
4、 h,但差異不顯著。 5.隨著感染劑量的增加,減毒株單卵囊的繁殖指數(shù)分別為2560、1035和567,而母株的分別為2630、1128和708。單卵囊繁殖能力與感染劑量成負(fù)相關(guān);同時(shí)在同等劑量感染的條件下,說(shuō)明減毒株的繁殖能力與母株相比有所減弱。 6.用感染劑量分別為1×10<'3>、5×10<'3>、10×10<'3>個(gè)卵囊/羽的E. tenella YL減毒株感染雛雞后第6 d,各組的相對(duì)增重率分別為對(duì)照組的82.4
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