日糧中添加水飛薊素對(duì)草魚(yú)脂質(zhì)代謝的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、水飛薊素是一種黃酮類(lèi)的植物提取物，從紫花水飛薊（Silybum marianum L.）的干燥果實(shí)中提取，主要由四種黃酮類(lèi)化合物組成，包含水飛薊賓A和B，異水飛薊賓A和B，水飛薊寧和水飛薊亭。在哺乳動(dòng)物上，水飛薊素具有保護(hù)肝臟、抗氧化抗炎作用，降血脂和降低內(nèi)臟脂肪沉積等作用，而有關(guān)水飛薊素對(duì)魚(yú)類(lèi)脂質(zhì)代謝的研究鮮有報(bào)道。在生產(chǎn)實(shí)踐中，飼料中油脂的過(guò)量添加或氧化油脂的使用，給養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)帶來(lái)諸多問(wèn)題，如內(nèi)臟脂肪過(guò)度蓄積，引起脂肪肝、腹腔脂肪過(guò)度

2、沉積、抗應(yīng)激力下降、肉質(zhì)品質(zhì)和風(fēng)味變化等，這已經(jīng)成為困擾和危害養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展的問(wèn)題之一。針對(duì)當(dāng)前面臨的問(wèn)題，本研究探討了不同脂肪或氧化油脂水平日糧中添加水飛薊素對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)、體組成、脂質(zhì)代謝和健康的影響。與此同時(shí)，利用離體細(xì)胞平臺(tái)研究，探討了水飛薊素對(duì)肝細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化過(guò)程中脂質(zhì)蓄積抑制的作用機(jī)制。主要試驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論如下:
　　1、日糧添加水飛薊素能夠抑制高脂日糧誘導(dǎo)的肝胰臟和腹腔脂肪組織脂質(zhì)的蓄積，并提高草魚(yú)抗氧化能力。采用2×

3、3雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，設(shè)計(jì)4％和8％脂肪水平（分別是low lipid，LL，和high lipid，HL）和0，100，200mg kg-1水飛薊素水平(SM0，SM100，SM200)的6種等氮等能的半純化日糧，飼喂草魚(yú)（初均重27.43±0.17克）82天，每個(gè)處理組4個(gè)重復(fù)。結(jié)果顯示日糧中添加水飛薊素顯著提高魚(yú)體的增重率、特定生長(zhǎng)率和蛋白質(zhì)效率，降低飼料系數(shù)。水飛薊素能夠促進(jìn)肝胰臟脂質(zhì)分解(HSL)和β-氧化(CPT1)相關(guān)基因

4、表達(dá)上調(diào)，抑制高脂日糧誘導(dǎo)的肝胰臟脂肪沉積。水飛薊素降低高脂日糧誘導(dǎo)的腹腔脂肪蓄積，通過(guò)下調(diào)脂質(zhì)合成相關(guān)基因的表達(dá)。水飛薊素可降低高脂日糧誘導(dǎo)的MDA含量，提高了抗氧化能力，有利于改善魚(yú)體健康。
　　2、水飛薊素可以緩解氧化豆油對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)的副作用，并改善氧化油脂誘導(dǎo)魚(yú)體脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)，降低魚(yú)體氧化應(yīng)激。采用2×3雙因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)方法，設(shè)計(jì)2.5％和6.5％氧化豆油水平（分別Low oxidized soybean oil level

5、，High oxidized soybean oil level，簡(jiǎn)寫(xiě)為L(zhǎng)O和HO）和3個(gè)水飛薊素濃度(0，100 mg kg-1和200 mg kg-1，簡(jiǎn)寫(xiě)為SMO，SM100，SM200)的6個(gè)處理組，并分別設(shè)置新鮮低豆油組（2.5％ Low fresh oil，LF）和新鮮高豆油組（6.5％ High fresh oil，HF）作為低氧化油脂組和高氧化豆油組的正常對(duì)照組，配制8種等氮（粗蛋白30％）的半純化日糧，飼喂草魚(yú)（初均重

6、60.01±0.77 g）80天，每個(gè)處理組3個(gè)重復(fù)。魚(yú)體的增重率、特定生長(zhǎng)率、日攝食率、餌料系數(shù)、成活率在所有試驗(yàn)處理組間均無(wú)顯著性差異，但在高氧化豆油日糧中添加水飛薊素后魚(yú)體增重率比HOSM0組平均提高了8.41-8.80％，低氧化豆油中添加水飛薊素后增重率比LOSMO組平均增加了10.16-19.77％，顯示水飛薊素可緩解氧化油脂對(duì)魚(yú)體生長(zhǎng)的副作用。水飛薊素可降低氧化油脂誘導(dǎo)龜體MDA含量，并提高抗氧化能力參數(shù)（CAT、GSH-P

7、x活性），表明水飛薊素能夠提高機(jī)體抗氧化能力，有利于提高魚(yú)體健康。
　　3、水飛薊素能夠抑制油酸誘導(dǎo)草魚(yú)肝細(xì)胞脂質(zhì)蓄積，并提高肝細(xì)胞抗氧化能力。體外培養(yǎng)草魚(yú)肝細(xì)胞，用400μmol L-1油酸對(duì)其進(jìn)行蓄脂誘導(dǎo)的同時(shí)，采用不同質(zhì)量濃度的水飛薊素處理24h，檢測(cè)了肝細(xì)胞活力、脂質(zhì)蓄積狀況、抗氧化指標(biāo)和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因表達(dá)狀況。結(jié)果顯示水飛薊素質(zhì)量濃度在100μg mL-1時(shí)能夠顯著抑制肝細(xì)胞脂質(zhì)蓄積，下調(diào)脂質(zhì)合成基因（FAS和SCD1

8、）表達(dá)，并能夠顯著提高肝細(xì)胞GSH含量。
　　4、水飛薊素能夠抑制草魚(yú)脂肪細(xì)胞分化，并提高脂肪細(xì)胞的抗氧化能力。利用離體培養(yǎng)草魚(yú)脂肪細(xì)胞的方法，采用不同濃度水飛薊素（50和100μg mL-1）持續(xù)處理分化的前體脂肪細(xì)胞6天。水飛薊素100μg mL-1顯著抑制了脂肪細(xì)胞甘油三酯含量，并抑制脂肪細(xì)胞分化相關(guān)的基因PPARγ，C/EBPα，SREBP1c，F(xiàn)AS，SCD1和LPL的mRNA表達(dá)以及PPARγ蛋白表達(dá)水平。水飛薊素降低