納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體促進水飛薊素口服吸收的研究.pdf

1、水飛薊素(silymarin，SM)系從菊科植物水飛薊的種子中提取的一類黃酮木脂素類成分，臨床上多用于治療急、慢性肝病。但是由于其水溶性和透過性都很差，水飛薊素的生物利用度很低，使其臨床應用受到了極大的限制?，F(xiàn)有的一些給藥系統(tǒng)雖在一定程度上可以提高水飛薊素的口服生物利用度，但其自身往往存在物理穩(wěn)定性差、載藥量低、生物相容性差等多方面的問題。尋找新型給藥系統(tǒng)或改善現(xiàn)有給藥系統(tǒng)以提高水飛薊素的生物利用度，對其高效制劑的進一步研發(fā)具有重要意義

2、。本文設計制備了水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體(SM-NLC)新型給藥系統(tǒng)，旨在提高水飛薊素的生物利用度;同時在細胞模型上和整體動物上對其促進口服吸收的機制進行初步探討。
　　以油酸、混合硬脂酸甘油酯分別作為液體和固體脂質(zhì)，磷脂及吐溫80作為混合乳化劑，熔融高壓均質(zhì)法制備納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體。油相與水相分別加熱至80℃，藥物和磷脂溶于適量氨水乙醇溶液后再分散到油相當中，油相與水相在高剪切作用下混合形成初乳，最后經(jīng)過高壓均質(zhì)機乳勻即得。對影響

3、NLC粒徑、包封率、載藥量的處方因素和制備條件進行了考察:處方因素中藥脂比及乳化劑/脂質(zhì)比例對NLC的制備結(jié)果具有較大的影響，而工藝因素中均質(zhì)壓力對NLC的粒徑也具有較大影響。為了獲得較高的包封率和載藥量以及合適的粒徑，篩選得到的最佳制備條件為:藥脂比4/29(w/w)，乳化劑與脂質(zhì)比例20/29(w/w)，液體與固體脂質(zhì)比9/20(w/w)，油相與水相比2.9/30(w/v)，均質(zhì)壓力20000 psi，均質(zhì)循環(huán)次數(shù)為5次。在此條件下

4、制得的NLC呈類球形，平均粒徑約為80 nm，Zeta電位約為-65 mV，包封率為87.55％，載藥量為8.32％。
　　根據(jù)最優(yōu)處方和制備工藝制備的水飛薊素NLC，體外釋放緩慢，12h在水中僅釋放25％，遠遠低于自制水飛薊素固體分散體微丸1h的釋放量(90％)，以及市售Legalon(R)膠囊12h的釋放量(67％)。但在體外脂解條件下，1h內(nèi)藥物可以釋放完全。脂解液經(jīng)超高速離心分離后，少部分分布于油相中4.63％;水相與沉淀

5、相中分布相當，分別為46.15％和49.22％。其中水相中溶解的藥物可能以膠束或混合膠束形態(tài)存在，最易被小腸吸收。
　　以市售Legalon(R)膠囊及自制固體分散體微丸為參比制劑，水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體為受試制劑，Beagle犬為動物模型，采用自身對照交叉試驗設計，進行了藥物動力學研究。在0-8 h內(nèi)定時取血，采用液液萃取的方法提取血漿中的藥物，HPLC法測定藥物含量。經(jīng)過計算得到的藥時曲線和藥動學參數(shù)顯示，水飛薊素納米結(jié)構(gòu)脂

6、質(zhì)載體體內(nèi)吸收速度快于市售Legalon(R)膠囊以及固體分散體微丸，其生物利用度分別是Legalon(R)膠囊以及固體分散體微丸的2.55倍和3.11倍。結(jié)果表明納米結(jié)構(gòu)脂質(zhì)載體可顯著提高水飛薊素的口服生物利用度。
　　在吸收機理研究過程中，共制備了六種納米脂質(zhì)制劑，其中NLC組包括SM-NLC、速溶SM和空白NLC混合體系(SMSD-NLC混合體系)、SM-NLC脂解液，SLN組包括SM固體脂質(zhì)納米粒(SM-SLN)、速溶SM

7、和空白SLN混合體系(SMSD-SLN混合體系)、SM-SLN脂解液。Beagle犬體內(nèi)比較了它們的生物利用度，其中兩種脂質(zhì)納米粒均明顯高于同組的其他脂質(zhì)制劑;NLC組中，SMSD-NLC混合體系和SM-NLC脂解液的生物利用度分別是SM-NLC的65.71％和74.86％; SLN組中SM-SLN混合體系和SM-SLN脂解液分別是SM-SLN的40.09％和58.56％。而含脂質(zhì)制劑的生物利用度又明顯高于不含脂質(zhì)的速釋制劑，將藥物的固

8、體分散體溶解于空白脂質(zhì)納米粒懸液中給藥的生物利用度比固體分散體的高出約2倍。結(jié)果表明脂質(zhì)成分的存在和脂質(zhì)納米粒結(jié)構(gòu)的完整性均是影響脂質(zhì)納米粒促進藥物吸收的重要因素。脂質(zhì)納米粒促進藥物口服吸收的機制除脂解作用外，還可能存在其他促吸收機制。
　　細胞轉(zhuǎn)運實驗中，建立了Caco-2單層細胞模型，于頂側(cè)加入脂質(zhì)納米粒(NLC/SLN)、藥物-空白脂質(zhì)納米?；旌象w系(NLC/SLN)及固體分散體，在基底側(cè)2小時內(nèi)定時取點，HPLC法測定各制

9、劑的累積轉(zhuǎn)運量并計算Papp值。結(jié)果顯示，五種制劑在2小時內(nèi)的累積轉(zhuǎn)運量及Papp值無明顯差異。體外實驗結(jié)果與動物體內(nèi)實驗結(jié)果不相符，推測，脂質(zhì)納米粒進入體內(nèi)后除了跨小腸上皮吸收外可能存在其他的吸收機制。細胞攝取實驗結(jié)果表明，脂質(zhì)納米粒(NLC/SLN)的細胞攝取量明顯高于同組藥物-空白脂質(zhì)納米?；旌象w系及固體分散體溶液，說明脂質(zhì)納米?？梢源龠M細胞內(nèi)化作用，進而提高攝取量。該作用機制有待進一步深入研究。
　　綜上，本文中制備了水飛