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文檔簡介
1、胃癌(Gastric cancer GC)是我國最常見的消化道腫瘤,其死亡率居各類惡性腫瘤之首。約為25.21/10萬。因此,對于胃癌發(fā)病分子機制及相關治療的研究已成為醫(yī)學研究領域的重點之一。迄今為止,胃癌相關基因不但己被廣泛研究,而且已被部分應用于對胃癌的診斷、治療和預后判斷。然而我們對胃癌的相關基因還不能完全明確,胃癌新的基因還需得到更加廣泛和深入的研究。為了探究胃癌中表達特異的基因,本課題利用熒光差異顯示技術篩選胃癌組織和癌旁組織
2、表達差異的基因并利用半定量PCR、定量PCR等方法進行驗證,得到了下列幾個方面的結果: 1)對胃癌組織和癌旁組織進行了20個FDD-PCR反應切取了3個差異片段。進行PCR二次擴增得到了穩(wěn)定的差異條帶2條。 2)對差異片段進行克隆測序,克隆到了2個cDNA片段。它們的編號依次為w1(226bp)、W2(175bp)。在NCBI BLAST數(shù)據庫進行同源性分析,結果顯示W1與人類膠原蛋白I型基因有100%的同源性, W2與
3、人類ribosomal proteinL15基因有100%的同源性。 3)對這w1的cDNA片段運用熒光定量PCR進行驗證,結果表明顯著高于其所對應的癌旁組織,并進一步在食管癌中進行驗證,發(fā)現(xiàn)人類膠原蛋白Ⅰ型基因在食管癌組織中的表達量也顯著高于其相對應的癌旁組織,且在食管癌較胃癌中表達更為顯著。 4)應用熒光定量PCR技術對人類膠原蛋白Ⅰ型基因基因在五種腫瘤細胞中的表達量的不同進行了探究。結果顯示,其在五種腫瘤細胞中的表
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