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1、本研究分為二部分: 實(shí)驗(yàn)一:PPARα的核內(nèi)激活對(duì)高糖高脂培養(yǎng)心肌細(xì)胞凋亡的影響 目的:探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)的核內(nèi)激活對(duì)高糖高脂培養(yǎng)的心肌細(xì)胞凋亡的影響。 方法:將培養(yǎng)的心肌細(xì)胞分為:①正常組(N組);②高糖高脂組(H組);③高糖高脂+Wy14643組(Ⅰ組);TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡,免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)各組細(xì)胞PPARα蛋白的表達(dá)部位,western blotting檢測(cè)各組細(xì)胞PPA
2、Rct和NF-κB蛋白的表達(dá)水平。 結(jié)果:與N組比較,H組凋亡細(xì)胞增多(P<0.01),胞核NF-κB蛋白表達(dá)增高(P<0.01),PPARα陽(yáng)性染色深,但其表達(dá)無(wú)明顯差異;與H組比較,Ⅰ組心肌細(xì)胞的凋亡數(shù)目下降(P<0.01),胞核NF-κB蛋白表達(dá)下降(P<0.01),PPARα蛋白表達(dá)增高(P<0.05)。 結(jié)論:胞核PPARα的表達(dá)增高可能通過(guò)抑制NF-κB途徑,減少高糖高脂培養(yǎng)的心肌細(xì)胞凋亡,有可能參與機(jī)體對(duì)高
3、糖高脂血癥的自我保護(hù)過(guò)程。 實(shí)驗(yàn)二:PPARα過(guò)度核表達(dá)對(duì)2型糖尿病大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響 目的:探討過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPARα)的過(guò)度表達(dá)對(duì)2型糖尿病大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響。 方法:將wistar大鼠分為:1、正常組(N組);2、2型糖尿病組(D組)。飼養(yǎng)16周后,TUNEL法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞凋亡,免疫組化和western blotting法檢測(cè)各組心肌細(xì)胞PPARα及NF-κB蛋白的表達(dá)。
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