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文檔簡介
1、目的:觀察黃芩苷對實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病大鼠心肌細(xì)胞凋亡及調(diào)控基因survivin表達(dá)的影響,探討黃芩苷對糖尿病大鼠心肌細(xì)胞的保護(hù)機(jī)制。
方法:30只健康雄性Wistar大鼠隨機(jī)分為對照組(NC組,n=10)、糖尿病組(DM組,n=10)、黃芩苷組(BAI組,n=10)。NC組喂養(yǎng)普通飼料,DM組及BAI組喂養(yǎng)高糖高脂飼料。喂養(yǎng)6w后,DM組及BAI組一次性腹腔注射鏈尿佐菌素(STZ)30mg/kg,一周后取大鼠尾靜脈血測定血糖
2、,隨機(jī)血糖≥16.7mol/L為糖尿病模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。建模后,BAI組給予黃芩苷150 mg·kg-1·d-1灌胃,DM組和NC組用等容量生理鹽水灌胃。灌胃8w后,測定體重,采血處死大鼠,測空腹血糖、空腹胰島素、甘油三酯、膽固醇、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白水平。采用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法(TdT-mediated dUTPnick end labeling,TUNEL)檢測心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)。逆轉(zhuǎn)錄—聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(
3、reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫組織化學(xué)法分別用于檢測大鼠心肌組織中survivinmRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)水平。
結(jié)果:(1)體重及血清學(xué)指標(biāo):與NC組比較,DM組及BAI組空腹血糖、空腹胰島素、甘油三酯、膽固醇、低密度脂蛋白水平升高(P<0.05或P<0.01),體重、高密度脂蛋白水平下降(P<0.01);與DM組比較,BAI組甘油三酯、膽
4、固醇、低密度脂蛋白水平下降(P<0.05),高密度脂蛋白水平顯著升高(P<0.05),體重、空腹胰島素、空腹血糖無顯著性差異(P>0.05)。(2)大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù):TUNEL結(jié)果顯示,與NC組比較,DM組及BAI組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)顯著升高(P<0.01);與DM組比較,BAI組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)下降(P<0.01)。(3)大鼠心肌組織survivin mRNA表達(dá):RT-PCR結(jié)果顯示,與NC組比較,DM組及BAI組survivin
5、 mRNA表達(dá)水平顯著下降(P<0.05或P<0.01);與DM組比較,BAI組survivin mRNA表達(dá)水平升高(P<0.01)。(4)大鼠心肌組織中survivin蛋白質(zhì)表達(dá):免疫組化結(jié)果顯示,與NC組比較,DM組及BAI組survivin蛋白質(zhì)表達(dá)水平顯著下降(P<0.01);與DM組比較,BAI組survivin蛋白質(zhì)表達(dá)水平升高(P<0.01)。
結(jié)論:黃芩苷對糖尿病大鼠心肌組織有保護(hù)作用。其機(jī)制可能是黃芩苷
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