2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:目前,抗腫瘤化療藥物的毒副作用,已成為其臨床應(yīng)用以及提高療效的主要障礙,尋找作用位點(diǎn)與現(xiàn)有化療藥物不同且特異性高、毒副作用小的抗腫瘤治療藥物成為腫瘤基礎(chǔ)和臨床研究的熱點(diǎn)。腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)又稱(chēng)凋亡素2-配體(Apo-2L),是TNF家族的新成員,以其對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷的高度特異性,而對(duì)正常細(xì)胞無(wú)明顯毒性,而備受矚目。本研究旨在觀察TRAIL對(duì)人NSCLC細(xì)胞的體外生長(zhǎng)抑制及誘導(dǎo)凋亡作用;以及與亞毒性劑量的DDP

2、聯(lián)合應(yīng)用是否具有協(xié)同抗腫瘤作用,并初步探討其作用機(jī)制。 方法:采用SRB染色法測(cè)定TRAIL、DDP單藥以及聯(lián)合應(yīng)用對(duì)NSCLC細(xì)胞NCI-H460和A549的生長(zhǎng)抑制作用,并繪制生長(zhǎng)抑制曲線(xiàn),計(jì)算半數(shù)抑制濃度(IC<,50>);Hoechst33342染色熒光顯微鏡觀察TRAIL、DDP單藥及聯(lián)合作用后,細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)變化;Annexin V-FITC/PI雙染色,流式細(xì)胞技術(shù)(FCM)檢測(cè)TRAIL、DDP單藥及聯(lián)用對(duì)細(xì)胞

3、凋亡率的影響;RT-PCR技術(shù)檢測(cè)藥物作用前后NCI-H460和A549細(xì)胞TRAIL膜受體DR4、DR5、DcR1、DcR2基因表達(dá)水平情況;Western blot分析藥物作用前后,NCI-H460細(xì)胞的Caspase-8、Caspase-9、Bcl-2和Bax蛋白表達(dá)水平的改變。 結(jié)果: 1.SRB結(jié)果顯示TRAIL在體外對(duì)人大細(xì)胞肺癌NCI-H460及肺腺癌A549細(xì)胞有明顯的生長(zhǎng)抑制作用,并具有明顯劑量依賴(lài)性,

4、NCI-H460對(duì)TRAIL的作用較為敏感,而A549細(xì)胞相對(duì)耐藥,IC<,50>值分別為6.119ng/ml和82.822μg/ml。DDP對(duì)NCI-H460、A549細(xì)胞均有明顯的細(xì)胞毒作用及劑量依賴(lài)性,IC<,50>值接近,分別為0.407μg/ml和0.519μg/ml。亞毒性劑量的DDP與TRAIL聯(lián)合應(yīng)用對(duì)NCI-H460及A549細(xì)胞具有協(xié)同抑制作用。 2.流式細(xì)胞術(shù)顯示,亞毒性劑量的DDP與TRAIL聯(lián)用能顯著增

5、加NCI-H460和A549的細(xì)胞凋亡。Hoechst33342熒光染色觀察到細(xì)胞皺縮、核碎裂、新月形核等典型的細(xì)胞凋亡特征性變化。 3.RT-PCR結(jié)果示,NCI-H460和A549細(xì)胞經(jīng)過(guò)TRAIL或/和DDP作用48h后,DR4和DR5的表達(dá)水平未發(fā)生明顯變化;NCI-H460細(xì)胞誘騙受體DcR2的表達(dá)略為下調(diào);誘騙受體DcR1未能檢測(cè)出。 4.Western blot結(jié)果表明,亞毒性劑量的DDP和TRAIL協(xié)同作

6、用NCI-H460細(xì)胞48h后,Caspase-8和Caspase-9蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng);Bel-2的表達(dá)無(wú)明顯變化;Bax的表達(dá)略為增強(qiáng)。 結(jié)論: 1.TRAIL可通過(guò)誘導(dǎo)凋亡的方式有效的抑制人大細(xì)胞肺癌NCI-H460及肺腺癌A549細(xì)胞的增殖。 2.亞毒性劑量的DDP與TRAIL對(duì)NCI-H460和A549細(xì)胞有協(xié)同抗腫瘤的作用,并協(xié)同增強(qiáng)NCI-H460和.A549的細(xì)胞凋亡。 3.亞毒性劑量的DD

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