毛囊干細胞與異種膀胱脫細胞基質生物相容性研究.pdf

1、目的：通過構建毛囊干細胞(Hair follicle stem cells，HFSCs)與異種膀胱脫細胞基質(bladder acellular matrix, BAM)為支架的細胞支架復合物，觀察細胞支架復合物的體外生物相容性，為HFSCs和異種BAM復合物修復膀胱缺損的研究提供前期的實驗基礎。
　　方法：聯(lián)合應用顯微分離法、二步酶法及差速貼壁法獲取大鼠HFSCs，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)特征，表面標志物CK15、β1整合素及C

2、D34聯(lián)合用于鑒定；制備新西蘭兔BAM，通過掃描電鏡和Masson染色檢測材料脫細胞效果，采用二次沉淀法將P3代HFSCs靜態(tài)接種于BAM表面，倒置顯微鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，并繪制細胞生長曲線，組織學檢測和掃描電鏡觀察細胞在材料表面的生長狀況。
　　結果：純化的HFSCs集落呈典型的“鋪路石狀”，CK15角質蛋白抗體免疫熒光染色呈陽性表達，流式細胞儀檢測PE標記的CD34呈較高表達，FITC標記的β1整合素成高表達。制備的BAM為

3、白色半透明膜狀,掃描電鏡下觀察為纖維網狀結構,未見細胞殘留。Masson染色提示BAM為膠原結構，無明顯細胞殘留，細胞毒性檢測表明材料無細胞毒性。細胞材料體外復合培養(yǎng)48h后倒置顯微鏡下觀察BAM周圍HFSCs生長狀態(tài)良好，HFSCs-BAM材料上細胞生長曲線與對照組類似，7-8天左右進入生長平臺期，掃描電鏡下觀察HFSCs伸展、粘附于BAM支架表面。體外復合培養(yǎng)1周行組織學檢測，可見1～3層細胞鋪于支架材料表面。
　　結論：HF