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文檔簡介
1、目的:
探索利用維甲酸（retinoic acid，RA）和Purmorphamine（PM）誘導(dǎo)皮膚源性前體細胞（skin-derived precursors，SKPs）向運動神經(jīng)元分化，為運動神經(jīng)元移植治療失神經(jīng)肌萎縮提供依據(jù)。
方法:
1.從新生大鼠皮膚分離SKPs，進行培養(yǎng)、增殖，采用免疫細胞化學(xué)法檢測SKPs標記物巢蛋白（Nestin）和纖維連接蛋白（Fibronectin）的表達。
2、2.使用RA、PM作為誘導(dǎo)因子，誘導(dǎo)第3代SKPs細胞球向MNs分化。
3.添加GDNF、BDNF等生長因子促使軸突延長，形成成熟的運動神經(jīng)元。
4.通過免疫細胞化學(xué)法檢測 MNs標記物 HB9和膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶（choline acetyltransferase，ChAT）的表達，鑒定分化細胞是否為運動神經(jīng)元，并計算ChAT、HB9陽性率。
結(jié)果:
1.分離培養(yǎng)的SKPs懸浮生長，細胞透亮，折光性
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