人嗜中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶通過(guò)腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶誘導(dǎo)慢性鼻-鼻竇炎中杯狀細(xì)胞增生的研究.pdf

1、目的:通過(guò)檢測(cè)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(HNE)、腫瘤壞死因子-α轉(zhuǎn)化酶(TACE)與黏蛋白MUC5AC在CRS患者中的表達(dá)情況,以及研究體外細(xì)胞培養(yǎng)試驗(yàn)中HNE通過(guò)TACE誘導(dǎo)MUC5AC表達(dá)的作用,提供HNE通過(guò)TACE誘導(dǎo)CRS中杯狀細(xì)胞增生的證據(jù),為進(jìn)一步了解CRS的發(fā)病機(jī)制提供幫助。
　　方法:取伴或不伴息肉CRS患者鼻竇黏膜各20例,另外取10例正常鼻腔鼻竇黏膜作為對(duì)照,用HE染色和PAS染色觀察各樣本病理改變,用免疫組化

2、的方法分別檢測(cè)HNE、TACE和MUC5AC在粘膜中的表達(dá)情況,并且用熒光定量PCR的方法分別檢測(cè)組織中HNE、TACE和MUC5AC mRNA的表達(dá)情況。建立體外原代鼻黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)模型,并且用細(xì)胞免疫化學(xué)的方法進(jìn)行鑒定,穩(wěn)定傳代后給予 HNE刺激,并且以腫瘤壞死因子轉(zhuǎn)換酶抑制劑-1(TAPI-1)為干預(yù)因素,用熒光定量PCR的方法檢測(cè)處理后細(xì)胞中MUC5ACmRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:HE染色結(jié)果顯示,在伴或不伴息肉 C

3、RS患者鼻竇黏膜中主要的病理特征是杯狀細(xì)胞,炎性細(xì)胞及黏膜下腺體增生。兩組CRS患者鼻竇粘膜上皮層 PAS染色均可見(jiàn)強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá),而正常對(duì)照組鼻竇粘膜層為弱陽(yáng)性表達(dá)。免疫組化結(jié)果顯示MUC5AC,TACE和HNE在兩組CRS患者的鼻竇黏膜中的表達(dá)均高于對(duì)照組,且差別均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),其中,MUC5AC和TACE主要表達(dá)于黏膜上皮杯狀細(xì)胞中,HNE在黏膜上皮和黏膜下腺體中均有表達(dá);兩組 CRS患者間各指標(biāo)的表達(dá)無(wú)差異(P>

4、0.05)。熒光定量 PCR結(jié)果表明伴息肉與不伴息肉CRS患者的鼻竇組織中MUC5AC,TACE和HNE mRNA的表達(dá)均增加,且與正常對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05),而兩組之間并無(wú)明顯差異(P>0.05)。體外培養(yǎng)的鼻粘膜上皮細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞角蛋白 AE1抗體染色后證實(shí)其為上皮源性,熒光定量PCR檢測(cè)表明給予HNE刺激后,其MUC5ACmRNA表達(dá)水平高于未刺激組,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);而用腫瘤壞死因子轉(zhuǎn)換酶抑制劑T