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文檔簡介
1、前言:
喉鱗狀細胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)是僅次于肺癌的呼吸道第2高發(fā)癌,也是頸部最常見的惡性腫瘤,約占全身惡性腫瘤的1.0%~8.4%,喉癌早期治療效果好,喉功能可保留,且5年生存率可達90%。流行病學調(diào)查表明喉癌在我國東北地區(qū)高發(fā),其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢,且喉癌的發(fā)生與吸煙、飲酒、寒冷刺激等環(huán)境因素有關。分子生物學研究表明,喉癌的發(fā)生、發(fā)展與Ha-ras、Ki-r
2、as、c-myc、EGF受體基因和C-ebr-2基因的擴增和過度表達密切相關,以及與抑癌基因P53、nm23-HI、P16和Rb的失活有關。
其中上皮細胞膜蛋白-1基因簡稱EMP-1(epithelial membrane protein-1)基因是在1995年由瑞士學者Taylor等從胎鼠腸cDNA文庫中克隆出并命名的,又叫:progression associated protein(PAP)、CL-20、TMP、B4B和
3、PMP22外周鞘磷脂蛋白,同屬一個跨膜家族。根據(jù)氨基酸結(jié)構(gòu)推測其定位在細胞膜上。在鱗狀上皮中富含該基因的mRNA。另有實驗發(fā)現(xiàn)該基因在支管鱗狀上皮細胞中大量表達。與此同時,一些相關研究也證實了EMP-1在胃癌、乳腺癌及子宮平滑肌瘤、腦膠質(zhì)瘤中均有不同程度的高表達,但也有學者發(fā)現(xiàn)在食管癌、喉癌、口腔鱗癌中、前列腺癌及鼻咽癌中EMP-1基因的表達明顯低于正常組織。近來發(fā)現(xiàn)EMP-1在頭頸癌中為下調(diào)基因。
EMP-1基因的分子生物學
4、初步研究結(jié)果顯示,EMP-1基因與腫瘤的發(fā)生與發(fā)展關系密切,特別是EMP-1基因可阻止腫瘤進一步擴增,該基因表達與細胞的浸潤和轉(zhuǎn)移特性有關,EMP-1基因可能是參與細胞信號傳導、細胞通信及黏附調(diào)節(jié)的調(diào)節(jié)因子之一,并且表面線粒體凋亡途徑參與了EMP-1誘導的細胞凋亡。然而EMP-1在喉癌中的發(fā)生、發(fā)展以及侵襲、轉(zhuǎn)移中的功能作用、及相關機制的研究尚處于空白階段,進一步研究EMP-1基因的相關功能及機制有可能為喉癌的分子診斷和基因治療提供新的
5、理論依據(jù)和新的策略,這對于處于空白的喉癌分子學研究有著重大的現(xiàn)實和臨床意義。
材料與方法:
共取51例喉癌標本和其癌旁組織。通過免疫組化、Western Blot、Quantitativereal-time RT-PCR從蛋白水平及mRNA水平檢測不同組標本EMP-1的表達,并分析與各臨床因素之間的相關性。構(gòu)建EMP-1過表達載體,轉(zhuǎn)染喉癌Hep2細胞系,通過MTT法檢測細胞的增殖變化、流式細胞法檢測細胞的凋亡變化、
6、Transwell法檢測細胞的侵襲、轉(zhuǎn)移變化情況,明確EMP-1過表達后對喉癌細胞產(chǎn)生的生物學效應。
實驗結(jié)果:
1、EMP-1在喉癌組織和細胞中的表達
免疫組化、Western Blot、RT-PCR結(jié)果顯示,EMP-1在喉癌組織中的蛋白、mRNA的表達明顯低于癌旁對照組織和良性腫瘤。
2、EMP-1對喉癌組織和細胞的部分生物學功能
EMP-1的過表達能抑制喉癌細胞的生長、促進喉癌細胞
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