腎移植受者IMPDH和HGPRT活性及基因多態(tài)性與硫唑嘌呤所致不良反應(yīng)的相關(guān)性研究.pdf

1、背景:
　　 抗代謝藥硫唑嘌呤(azathioprine，AZA)在臨床上常用于器官移植、急性白血病、自身免疫疾病和慢性炎癥性腸病的治療。由于該藥治療窗狹窄，易出現(xiàn)肝臟損害、血液毒性及胃腸紊亂等不良反應(yīng)，從而導致治療中斷或失敗。研究發(fā)現(xiàn)，硫嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶(TPMT)，三磷酸肌苷焦磷酸酶(ITPA)的活性和基因多態(tài)性與AZA所致不良反應(yīng)相關(guān)，但僅能解釋部分AZA所致的不良反應(yīng)。次黃嘌呤鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT)及次黃嘌呤磷

2、酸脫氫酶(IMPDH)是AZA代謝過程中的重要代謝酶，該兩種酶是否和AZA所致的不良反應(yīng)相關(guān)尚不清楚。
　　 目的:
　　 本項目擬研究AZA代謝酶HGPRT及IMPDH活性和多態(tài)性與AZA所致不良反應(yīng)的關(guān)系，以便為臨床合理使用AZA提供理論和實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 本研究選擇了86例正在服用或曾經(jīng)服用過AZA的腎移植受者以及304例健康志愿者作為研究對象，回顧性研究此86例腎移植受者發(fā)生不良反應(yīng)

3、情況，分析不良反應(yīng)發(fā)生的高危因素。建立高效液相色譜法(HPLC)測定人紅細胞中HGPRT活性，采用直接測序法檢測了HGPRT IVS6-12C＞A、IMPDHⅠ型中rs2278293、IMPDHⅡ型中rs11706052的基因型，采用限制性片斷長度多態(tài)性(PCR-RFLP)的方法，測定了IMPDHⅠ型中rs2278294的基因型，結(jié)合腎移植受者發(fā)生不良反應(yīng)的情況，系統(tǒng)地分析了IMPDH和HGPRT活性和基因多態(tài)性與AZA所致不良反應(yīng)的關(guān)

4、系。
　　 結(jié)果:
　　 86例入選患者中，共有36例患者出現(xiàn)AZA所致的不良反應(yīng)，其中有14例為血液毒性、11例為肝臟毒性、9例為胃腸道反應(yīng)、3例為流行性感冒樣癥狀，給予減劑量或停藥或?qū)ΠY處理后均能自行恢復(fù)。不良反應(yīng)發(fā)生率高達41.86％。男性患者服用AZA后所致肝臟損害的風險是女性患者的9.670倍(p＜0.05)。其他非遺傳性機體因素和合并用藥不會增加AZA所致不良反應(yīng)的風險。
　　 本研究中，86例腎移植

5、受者HGPRT活性范圍為44.59-262.16 U，平均為100.17±33.50U，健康受試者HGPRT活性范圍為28.43-153.65 U，平均為99.30±17.21U，均呈正態(tài)分布。兩組HGPRT活性均值差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。健康受試者和腎移植受者的HGPRT高活性、低活性和正常活性分布的差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)，腎移植受者組的HGPRT低活性頻率明顯高于健康受試者組(P＜0.05)，正?；钚灶l率則明顯低

6、于健康對照組(P＜0.05)。
　　 入選腎移植患者中發(fā)現(xiàn)2例HGPRT IVS6-12C＞A突變體，突變頻率為2.3％。而健康受試者中未發(fā)現(xiàn)突變，分析發(fā)現(xiàn)HGPRT活性與基因型之間無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。流行性感冒樣癥狀組患者的平均HGPRT活性明顯高于腎移植對照組（147.47±101.24U vs100.46±29.31U，p＜0.05），而血液毒性組、肝臟毒性組、胃腸道反應(yīng)組與腎移植對照組比較，活性差異無統(tǒng)計學意義

7、。AZA所致不良反應(yīng)與HGPRT基因多態(tài)性之間沒有明顯相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 腎移植受者組IMPDH rs2278293、rs2278294、rs11706052突變頻率分別為9.20％，68.97％和6.90％，健康受試者組則分別為14.14％、77.96％和9.87％。兩組間各位點的突變頻率差異均無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。但兩組間rs2278294基因型分布差異具有統(tǒng)計學意義(p＜0.001)，腎移植受者組的GA

8、基因型頻率明顯高于健康受試者組(p＜0.01)，AA基因型頻率則明顯低于健康受試者組(p＜0.001)。rs2278294與AZA所致血液毒性呈明顯相關(guān)性(P＜0.05)，rs2278294突變型雜合子會導致AZA所致血液毒性的發(fā)生，而rs2278293、rs11706052突變型與AZA所致不良反應(yīng)沒有相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 因此，在服用AZA之前，測定患者HGPRT活性，篩選出HGPRT高活性者有利于避免AZA所致流