補腎平喘方對大鼠哮喘模型的作用及機(jī)制的實驗初探.pdf

1、目的：
　　通過觀察補腎平喘方（Bushen Pingchuan Prescription）對大鼠哮喘模型的防治作用，初步探討本方抗哮喘的作用及作用機(jī)制，為該處方的進(jìn)一步開發(fā)提供初步的實驗依據(jù)。
　　方法：
　　SPF級清潔雄性SD大鼠60只，采用腹腔注射卵蛋白（OVA）與氫氧化鋁致敏、OVA霧化吸入激發(fā)來復(fù)制哮喘動物模型。第1，7天除空白對照組外，其余大鼠腹腔注射卵蛋白（OVA）與氫氧化鋁致敏，之后將其隨機(jī)分為5組：

2、模型組（等容量蒸餾水）、補腎防喘片組(6.21g/kg)、補腎平喘方高劑量組(49.68g/kg)、補腎平喘方中劑量組(24.84g/kg)、補腎平喘方低劑量組(12.42g/kg)，每組10只。第15天起每天霧化激發(fā)，于激發(fā)前半小時各給藥組給藥。第1,2周霧化濃度為1％，第3,4周為1.5％，第5,6周為2％，第7,8周為2.5％。
　　于末次給藥激發(fā)后，禁食24h，麻醉、取血、取大鼠肺臟；測定肺臟重量、肺臟指數(shù)，分離取血清及血

3、漿,采用ELISA法檢測血清中IL-4，IFN-γ，IgE，CORT的含量及血漿中ACTH的含量。將肺組織放入10％的甲醛里浸泡，待進(jìn)行HE染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠肺組織形態(tài)結(jié)構(gòu)，自動成像系統(tǒng)拍攝圖片。免疫組化法檢測肺組織內(nèi)β-AR的含量。
　　結(jié)果：
　　1.補腎平喘方通過補腎溫陽、宣肺降氣，改善大鼠腎虛哮喘癥狀如精神萎靡、喘息、咳嗽等。
　　2.補腎平喘方能顯著降低大鼠肺臟指數(shù)，與模型空白組相比有顯著差異性（P

4、﹤0.01），其中補腎平喘方中劑量組效果明顯。
　　3.補腎平喘方能顯著改善哮喘肺組織病理水平，與模型空白組相比具有顯著性差異。
　　4.補腎平喘方能顯著降低血清IL-4同時升高血清IFN-γ的水平，與模型對照組相比有顯著差異性（P﹤0.05、P﹤0.01），抑制Th2細(xì)胞的優(yōu)勢表達(dá)，調(diào)節(jié)哮喘炎性反應(yīng)。
　　5.補腎平喘方顯著降低大鼠血清中 IgE的水平，與模型對照組相比有顯著差異性（P﹤0.05、P﹤0.01）。

5、r>　　6.補腎平喘方能顯著降低大鼠血清CORT，血漿ACTH的水平，調(diào)節(jié)HPA軸的功能，與模型對照組相比，差異具有顯著性（P﹤0.01、P﹤0.05）。
　　7.補腎平喘方能提高大鼠肺組織中β-AR的水平，與模型對照組相比具有顯著性差異（P﹤0.05、P﹤0.01）。
　　結(jié)論：
　　1.哮喘模型組大鼠肺臟病理形態(tài)顯著病變，血清中IL-4升高、IFN-γ降低，IgE顯著提高，同時大鼠出現(xiàn)一系列的腎虛癥狀精神萎靡、喘息

6、、咳嗽等，證明采用卵蛋白加氫氧化鋁注射致敏并給予霧化激發(fā)可以成功復(fù)制哮喘動物模型。
　　2.補腎平喘方降低大鼠肺臟指數(shù)、血清IL-4與IgE，同時升高IFN-γ水平，可能與抑制Th2細(xì)胞的優(yōu)勢表達(dá)，調(diào)節(jié)Th1與Th2的平衡有關(guān)。
　　3.補腎平喘方能升高 CORT，ACTH的表達(dá)，減輕肺組織病變程度，可能與調(diào)節(jié) HPA軸的平衡有關(guān)，即通過下丘腦-腺垂體-腎上腺軸來調(diào)節(jié)糖皮質(zhì)激素的水平，發(fā)揮免疫抑制及抗炎作用；此外還提高了?–