2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是最為常見(jiàn)的腦部惡性腫瘤,也是膠質(zhì)瘤當(dāng)中惡性程度最高(WHO分級(jí)Ⅳ級(jí))的一種。目前,盡管手術(shù)切除輔以術(shù)后積極的放化療已經(jīng)成為惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的標(biāo)準(zhǔn)治療方案,然而患者在確診之后,平均生存期仍僅有14個(gè)月。因此,尋找切之有效的抗惡性膠質(zhì)瘤的靶向藥物是目前惡性膠質(zhì)瘤研究迫切需要解決的問(wèn)題。本課題我們研究蛋白激酶B抑制劑哌立福新(perfosine,PRF)對(duì)惡性膠質(zhì)瘤U251、U87MG細(xì)胞增殖、Akt/mTOR、AMP

2、K及其生長(zhǎng)因子受體(PDGFR、EGFR)信號(hào)通路關(guān)鍵蛋白表達(dá)水平的影響及可能的機(jī)制。
  方法:⑴取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,以不同濃度的哌立福新作用人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞后,用MTT法,集落形成實(shí)驗(yàn),臺(tái)盼藍(lán)染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)哌立福新對(duì)惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的作用。⑵Western blot、免疫熒光檢測(cè)哌立福新作用于惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞后Akt/mTOR、AMPK信號(hào)通路中總的和磷酸化的Akt、S6、4EBP1、LKB1、AMPKα、ACC的改變,同

3、時(shí)檢測(cè)生長(zhǎng)因子受體(EGFR、PDGFRα、PDGFRβ)的表達(dá)。⑶RT-PCR檢測(cè)生長(zhǎng)因子受體相關(guān)基因EGFR、PDGFRα、PDGFRβ的表達(dá)。
  結(jié)果:①哌立福新能有效抑制惡性膠質(zhì)瘤U87MG、U251細(xì)胞的體外增殖并呈濃度、時(shí)間依賴性,且在有效濃度范圍內(nèi)對(duì)正常小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞無(wú)明顯的抑制作用。②流式細(xì)胞檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示哌立福新能夠誘導(dǎo)人惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞周期阻滯在G2/M期,而在較高濃度時(shí),哌立福新可以促進(jìn)凋亡,且呈濃度

4、依賴性。③Western Blot及細(xì)胞免疫熒光結(jié)果顯示,哌立福新抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中Akt/mTOR信號(hào)通路,同時(shí)活化AMPK并使生長(zhǎng)因子受體EGFR、PDGFRα、PDGFRβ表達(dá)下調(diào),而PCR結(jié)果則表明哌立福新并不能從基因水平上影響惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞中受體PDGFR的表達(dá)。
  結(jié)論:哌立福新抑制惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞的增殖、誘導(dǎo)周期阻滯且在較高濃度下促進(jìn)凋亡。此外,哌立福新通過(guò)調(diào)節(jié)Akt/mTOR、AMPK信號(hào)通路,下調(diào)生長(zhǎng)因子受體的

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