LPS誘導(dǎo)血小板減少癥與DIC關(guān)系的研究.pdf

1、目的：
　　通過腹腔注射脂多糖(LPS)建立小鼠血小板減少癥模型，觀察不同劑量LPS對小鼠血小板數(shù)量的影響；通過檢測MPV、血漿TPO水平判斷LPS誘導(dǎo)的血小板減少癥和血小板生成的關(guān)系；通過監(jiān)測血漿TAT、D-二聚體、FDPs水平分析凝血系統(tǒng)在血小板減少癥中的作用；通過組織病理學(xué)檢查判斷LPS引起的血小板減少時(shí)各臟器的病理改變，并探討其與彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的關(guān)系。
　　方法：
　　本實(shí)驗(yàn)分為兩部分。
　　

2、第一部分：建立血小板減少癥模型。采用SPF級C57BL/6雄性小鼠，75只，8～10周齡，體重18～22g，隨機(jī)分為生理鹽水對照組(C組)、低劑量LPS組(L組)、中等劑量LPS組(M組)、高劑量LPS組(H組)和極高劑量LPS組(S組)。C、L、H、M、S組各15只，分別給予腹腔注射生理鹽水5ml/kg、LPS0.05、0.5、5、50mg/kg。觀察并記錄小鼠反應(yīng)、死亡時(shí)間，并按照時(shí)點(diǎn)經(jīng)內(nèi)眥取血，檢測小鼠血常規(guī)，記錄血小板數(shù)量。

3、r>　　第二部分：觀察不同劑量LPS對血小板生成和凝血系統(tǒng)的影響。采用SPF級C57BL/6雄性小鼠，8～10周齡，體重18～22g，隨機(jī)分為生理鹽水4h和24h對照組(C1和C2組)、低劑量LPS4h組(LL4組)、高劑量LPS4h組(HL4組)、低劑量LPS24h組(LL24組)、高劑量LPS24h組(HL24組)。其中C1、LL4、HL4組分別給予腹腔注射生理鹽水、LPS0.5mg/kg、LPS50mg/kg，4h后經(jīng)內(nèi)眥取血并脫

4、頸處死；C2、LL24、HL24組給予腹腔注射生理鹽水、LPS0.5mg/kg、LPS50mg/kg，24h后經(jīng)內(nèi)眥取血并脫頸處死。檢測血常規(guī)，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血漿中TPO、D-二聚體、TAT、FDPs水平；摘取小腸和肺組織進(jìn)行HE染色，觀察組織病理學(xué)改變并進(jìn)行組織損傷病理學(xué)評分。
　　結(jié)果：
　　C57BL/6小鼠對腹腔注射LPS反應(yīng)敏感。低劑量LPS(0.05mg/kg)在注射后2h即可誘發(fā)小鼠發(fā)生血小板減少，且血

5、小板減少的程度隨著LPS劑量的增加而加重。當(dāng)注射極高劑量LPS(50mg/kg)時(shí)，小鼠72h死亡率高于70％。L組的血小板計(jì)數(shù)(PLT)在腹腔注射LPS后8h降至最低，然后逐漸回升，24h后恢復(fù)正常；M組、H組的PLT在腹腔注射LPS后24h降至最低，然后逐漸回升，72h后M組恢復(fù)正常，而H組仍稍低于正常。S組的血小板數(shù)量呈進(jìn)行性下降并且無回升趨勢。
　　注射LPS后4h，LL4組、HL4組的PLT顯著低于C1組(P<0.05)

6、，HL4組的PLT。顯著低于LL4組(P<0.05)；LL4組、HL4組的白細(xì)胞計(jì)數(shù)(WBC)顯著低于C1組(P<0.05)，而HL4組與LL4組相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)；LL4組、HL4組的平均血小板體積(MPV)稍高于C1組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；三組的血漿TPO、D-二聚體、FDPs水平無顯著性差異(P>0.05)；LL4組、HL4組的血漿TAT水平顯著低于C1組(P<0.05)，而HL4組與LL4組相比無顯著性

7、差異(P>0.05)；HL4組、LL4組的小腸和肺組織損傷評分顯著高于C1組(P<0.05)，并且HL4組的評分顯著高于LL4組(P<0.05)。
　　注射LPS后24h，LL24組、HL24組的PLT、WBC顯著低于C2組(P<0.05)，并且HL24組的PLT、WBC顯著低于LL24組(P<0.05)：LL24組、HL24組的MPV顯著高于C2組(P<0.05)；三組的血漿TPO、D-二聚體、FDPs水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.

8、05)；LL24組、HL24組的血漿TAT水平顯著低于C2組(P<0.05)，并且HL24組的TAT水平顯著低于LL24組(P<0.05)；HL24組、LL24組的小腸和肺組織損傷病理學(xué)評分顯著高于C2組(P<0.05)，并且HL24組的評分顯著高于LL24組(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、在血小板減少癥模型中，C57BL/6小鼠對腹腔注射LPS反應(yīng)敏感，注射低劑量LPS(0.05mg/kg)后2h即可誘發(fā)小鼠發(fā)生明