MicroRNA-33模擬物及抑制物對(duì)hepG2細(xì)胞甘油三酯的影響及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　探討 miR-33a和 miR-33b模擬物(mimics)及抑制物(inhibitors)對(duì)肝癌細(xì)胞（hepG2）甘油三酯（Triglyceride TG）的影響及其作用機(jī)制的研究。
　　方法：
　　將實(shí)驗(yàn)分為五組：第一組miR-33a mimic組：加入50nM miR-33a模擬物；第二組miR-33a inhibitor組：加入100nM miR-33a抑制物；第三組miR-33b mimic組：加

2、入50nM miRNA-33b模擬物；第四組miR-33b inhibitor組：加入100nM miRNA-33b抑制物；第五組正常對(duì)照組：加入陰性對(duì)照50nM microRNA。
　　1.在實(shí)驗(yàn)前用Iipofectamin2000轉(zhuǎn)染不同濃度的陰性對(duì)照microRNA，并用熒光顯微鏡檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率，確定轉(zhuǎn)染microRNA的濃度。
　　2、通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time PCR RT-PCR)檢測(cè)hepG2細(xì)胞

3、中miR-33a和miR-33b的表達(dá)情況。
　　3.通過檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量，觀察miR-33a和miR-33b對(duì)hepG2細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量的影響。
　　4. Western blot檢測(cè)5-磷酸腺苷激活的蛋白激酶（5-AMP Activated Protein Kinase AMPK）的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：
　　1、轉(zhuǎn)染miR-33a mimics組較對(duì)照組miR-33a含量升高，相反地轉(zhuǎn)染miR-33

4、a inhabitors組較對(duì)照組miR-33a含量降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、轉(zhuǎn)染miR-33b mimics組較對(duì)照組miR-33b含量升高，相反地轉(zhuǎn)染miR-33b inhibitors組較對(duì)照組miR-33b含量降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
　　3、分別轉(zhuǎn)染miR-33a或miR-33b mimics組較對(duì)照組TG含量升高，而分別轉(zhuǎn)染miR-33a或miR-33b inhibitors組較對(duì)照組TG含量降低，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意