EBV與TPA分別及協(xié)同處理CNE2細(xì)胞誘導(dǎo)基因表達(dá)差異的蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、第一軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文EBV與TPA分別及協(xié)同處理CNE2細(xì)胞誘導(dǎo)基因表達(dá)差異的蛋白質(zhì)組學(xué)研究姓名：江培洲申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：病理學(xué)指導(dǎo)教師：姚開(kāi)泰20030601胞在分子水平上的表達(dá)差異，對(duì)闡明EBV的感染及鼻咽癌發(fā)生的機(jī)制同樣有著重要意義。因此，我們用EBV和TPA分別及聯(lián)合處理鼻咽上皮細(xì)胞，比較細(xì)胞在EBV感染及TPA處理前后分子水平上的基因表達(dá)差異，從而尋找與它們的生物學(xué)性能相關(guān)的生物大分子，為闡明EBV感染及鼻咽癌發(fā)生的

2、機(jī)理奠定基礎(chǔ)。由于人正常鼻咽原代上皮材料來(lái)源很少，分離培養(yǎng)困難，傳代增殖有限，無(wú)法滿(mǎn)足實(shí)驗(yàn)的需要，并且有報(bào)道認(rèn)為在正常條件下，EBV不能感染未轉(zhuǎn)化的鼻咽部鱗狀上皮細(xì)胞，因此我們擬選用鼻咽部低分化鱗癌上皮細(xì)胞株CNE2進(jìn)行研究。根據(jù)前人的工作經(jīng)驗(yàn)，感染與未感染的細(xì)胞間接觸培養(yǎng)及感染的方式是目前發(fā)現(xiàn)的新的EBV感染方法，因此我們選用該法用于感染試驗(yàn)。EBV感染及TPA作用的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞分為四組，即未作任何處理的CNE2，EBV處理的CNE2，T

3、PA處理的CNE2，EBV和TPA聯(lián)合處理的CNE2，分別同步培養(yǎng)處理，然后用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)表明B95—8病毒株在接觸感染實(shí)驗(yàn)中能有效地使鼻咽癌上皮細(xì)胞CNE2感染EBV，與前人用其它的EB病毒株進(jìn)行接觸感染的結(jié)果相符，這提示了細(xì)胞間接觸感染是建立EBV自發(fā)感染上皮細(xì)胞的模型的可行方法。為了揭示CNE2細(xì)胞在EBV感染及TPA處理前后生物學(xué)特征變化的分子機(jī)理，我們采用了新一代鑒定基因表達(dá)差異的技術(shù)一一功能蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)作為研究方法。該