人表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞蛋白質(zhì)組的差異表達(dá)初步研究.pdf

1、同體或異體角膜移植、同體或異體角膜緣上皮細(xì)胞移植，都存在材料來(lái)源有限和免疫排斥等缺陷。利用表皮干細(xì)胞橫向分化產(chǎn)生角膜上皮細(xì)胞，為構(gòu)建組織工程角膜提供種子細(xì)胞，在技術(shù)層面上已有一定的積累，但是關(guān)于橫向分化的分子機(jī)制依然不清楚。目前國(guó)內(nèi)外關(guān)于人表皮細(xì)胞與人角膜上皮細(xì)胞蛋白質(zhì)組學(xué)研究未見報(bào)道。本文應(yīng)用蛋白質(zhì)組技術(shù)比較表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞之間的蛋白質(zhì)表達(dá)差異，旨在揭示成體干細(xì)胞橫向分化的分子機(jī)制以及為篩選表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞的差異分子標(biāo)簽提

2、供參考。 本論文首先分離和培養(yǎng)了人表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞，然后，應(yīng)用蛋白質(zhì)雙向凝膠電泳分別對(duì)人表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞總蛋白進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析，用基質(zhì)輔助激光解吸附/電離飛行時(shí)間串級(jí)質(zhì)譜法(MALDI-TOF-MS/MS)鑒定差異蛋白，獲得人表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞蛋白質(zhì)600余個(gè)清晰的蛋白質(zhì)斑點(diǎn)。結(jié)果表明人表皮細(xì)胞與角膜上皮細(xì)胞在蛋白質(zhì)表達(dá)上有較高的相似性以及較好的可比性；在比較分析出的26個(gè)差異點(diǎn)中，初步鑒定出四個(gè)差異表達(dá)蛋白

3、，分別是Chlorideintracellular channel 1 (細(xì)胞內(nèi)氯離子通道1)、Psoriasin、Chain D，HumanB Lactate Dehydrogenase (乳酸脫氫酶B) 和 serine (or cysteine) proteinaseinhibitor (絲氨酸蛋白酶抑制因子)；對(duì)四個(gè)蛋白的可能功能進(jìn)行了初步分析。本實(shí)驗(yàn)為探索表皮細(xì)胞橫向分化成角膜上皮細(xì)胞的分子機(jī)制做出了有益的嘗試，并提供了具有一