OSW-1影響肝癌細(xì)胞線粒體功能的初步研究.pdf

1、目的：初步研究OSW-1對SK-Hep1肝癌細(xì)胞線粒體功能的作用。
　　方法：①通過溴化乙錠建立線粒體 DNA缺失的肝癌細(xì)胞模型ρ0SK-Hep1，并通過PCR及營養(yǎng)缺陷型方法進(jìn)行鑒定。②通過WST-8法檢測細(xì)胞的增殖并繪制SK-Hep1細(xì)胞與ρ0SK-Hep1細(xì)胞的生長曲線和在OSW-1作用下的抑制率。③多功能酶標(biāo)儀觀察 OSW-1作用下SK-Hep1、ρ0SK-Hep1細(xì)胞內(nèi)ATP及ROS產(chǎn)生情況。
　　結(jié)果：①ρ0SK

2、-Hep-1細(xì)胞在不含丙酮酸和尿嘧啶核苷的培養(yǎng)基中無法生存。而在含丙酮酸和尿嘧啶核苷的培養(yǎng)基中可以正常生長并增殖。聚合酶鏈反應(yīng)顯示，SK-Hep1細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞色素氧化酶I、II和 G3PDH，而ρ0SK-Hep1細(xì)胞只表達(dá) G3PDH。②OSW-1作用于 SK-Hep1、ρ0SK-Hep1細(xì)胞后，SK-Hep1細(xì)胞的生長明顯受抑制（p<0.01），而對ρ0SK-Hep1細(xì)胞作用不明顯(p>0.05)。SK-Hep1細(xì)胞 ATP生成減少(

3、p<0.01)，而對ρ0SK-Hep1細(xì)胞作用不明顯(p>0.05)。③OSW-1與多柔比星作用于SK-Hep1、ρ0SK-Hep1細(xì)胞后，SK-Hep1細(xì)胞隨著兩種藥物濃度的增高而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)ROS隨之增高，但OSW-1較之于多柔比星的作用更為明顯，而OSW-1對ρ0SK-Hep1細(xì)胞的作用不明顯。
　　結(jié)論：①ρ0SK-Hep1細(xì)胞較母本細(xì)胞株 SK-Hep1細(xì)胞增長緩慢，ATP生成減少、ROS生成增加。
　?、贠SW-1