豬骨膠原多肽的制備及其抗氧化性研究.pdf

1、我國是一個生豬生產(chǎn)大國，豬骨加工具有重要意義。豬骨膠原多肽是將豬骨膠原水解而得到的具有特殊生理功能的一系列多肽的總稱。膠原多肽具有很多的特殊生理功能，抗氧化功能是其重要的功能之一。本研究較系統(tǒng)地研究了豬骨膠原多肽的制備條件和抗氧化功能。 1.豬骨膠原多肽的制備 在確定了中性蛋白酶適合制備豬骨膠原多肽的基礎(chǔ)上，采用五元二次回歸正交旋轉(zhuǎn)組合設(shè)計的方法，對中性蛋白酶酶解制備膠原多肽建立了如下的回歸方程： Y=52.57

2、+5.8X1-2.84X2+2.02X3+7.62X4+6.85X5+0.25X1X2+1.01X1X3+1.3X1X4+2.14X1X5-0.19X2X3-0.73X2X4+0.78X2X5+0.53X3X4+0.17X3X5+0.66X4X5+1.16X12-3.29X22-3.36X32-4.91X42-3.41X52經(jīng)方差分析檢驗顯示該回歸方程失擬性不顯著，擬合度高。在建立回歸方程的基礎(chǔ)上，采用統(tǒng)計選優(yōu)法對中性蛋白酶酶解制備膠原

3、多肽的最優(yōu)酶解條件進(jìn)行了預(yù)測，結(jié)果顯示最優(yōu)酶解條件為：[E]/[S]=9.8％～10％，[S]=3％～3.6％，pH=7.5～7.7，T=46.4℃～48.1℃，t=4.5h～4.8h。 采用葡聚糖凝膠(SephadexG-25)對豬骨膠原多肽進(jìn)行洗脫分級，得到6個級分，各級分對超氧陰離子的清除能力大小不一，其中清除能力最大的一個級分的半抑制濃度(IC50)為4.11mg/ml。 2.豬骨膠原多肽的抗氧化功能研究

4、 采用H2O2為氧化劑檢測膠原多肽的抗氧化能力。結(jié)果表明：膠原多肽具有較強(qiáng)的抗氧化能力，其抗氧化能力僅次于二丁基羥基甲苯(BHT)，大于谷胱甘肽(GSH)和抗壞血酸(Vc)，而且抗氧化能力隨著濃度的增大而增強(qiáng)。 采用Fenton反應(yīng)體系對膠原多肽的羥基自由基清除能力進(jìn)行了檢測。結(jié)果表明：膠原多肽具有較強(qiáng)的羥基自由基清除能力，其清除能力略大于谷胱甘肽，隨著濃度的增大而增強(qiáng)，而且無助氧化作用。 采用豬油、菜油和豆油體系對膠原