發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對(duì)大鼠腦海馬、大腦皮質(zhì)mGluR5和Homer-1b-c表達(dá)和學(xué)習(xí)記憶的影響.pdf

1、目的:鉛是具有神經(jīng)毒性的重金屬元素。低濃度的鉛暴露辦能引起神經(jīng)系統(tǒng)的損傷,包括智商降低、聽力及視力的減退和外周神經(jīng)功能的損害。研究表明,生長(zhǎng)發(fā)育期的神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)鉛更敏感,即使鉛暴露濃度低于兒童鉛中毒的下限值10μg/dl也能損傷其神經(jīng)系統(tǒng)。嬰幼兒鋁暴露可引起不可逆的神經(jīng)系統(tǒng)損害,主要表現(xiàn)為學(xué)習(xí)記憶能力降低和神經(jīng)行為異常,并且這種損傷可持續(xù)到成年階段,甚至終生。海馬和皮質(zhì)是參與學(xué)習(xí)記憶形成的重要腦區(qū),研究者也已經(jīng)證實(shí)鉛通過(guò)作用于海馬來(lái)影響學(xué)

2、習(xí)記憶功能。近些年來(lái),人們對(duì)鉛對(duì)學(xué)習(xí)記憶的影響及其細(xì)胞和分子學(xué)機(jī)制做了廣泛的研究。但具體的機(jī)制仍然不清楚,故開展其相關(guān)機(jī)制研究具有重要意義。
　　 本研究通過(guò)母鼠產(chǎn)仔當(dāng)天開始給予低濃度醋酸鉛水溶液建立發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露模型,研究仔鼠各發(fā)育階段海馬和皮質(zhì)中的代謝型谷氨酸受體5(mGluR5)和Homer-lb/c蛋白表達(dá)及成年期學(xué)習(xí)記憶能力的改變情況,探討鉛影響學(xué)習(xí)記憶的機(jī)制,為兒童鉛中毒的預(yù)防提供新的理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

3、r>　　 方法:健康3月齡雌性人鼠30只,按體重隨機(jī)分成對(duì)照組、低劑量鉛暴露組1、2,每組10只雌鼠。各組大鼠均飼以普通飼料,飲用雙蒸水。適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后雌鼠和正常雄鼠1:1合籠,以次晨發(fā)現(xiàn)陰栓或陰道分泌物鏡檢發(fā)現(xiàn)精子者確定為妊娠0天,并單獨(dú)喂養(yǎng)母鼠,自生產(chǎn)第一天低劑量鉛暴露組1、2分別飲用0.05％、0.2％醋酸鉛溶液,直到仔鼠出生后28天(PN28d)。對(duì)照組繼續(xù)飲用雙蒸水。鉛暴露組仔鼠斷乳前通過(guò)母乳飲用醋酸鉛,斷乳后繼續(xù)飲用相同

4、濃度醋酸鉛。PN7d、PN14d、PN21d、PN28d解剖動(dòng)物取出腦海馬和大腦皮質(zhì),放入液氮中,轉(zhuǎn)存到-70℃冰箱中;PN28d測(cè)腦鉛和血鉛;PN56d進(jìn)行水迷宮實(shí)驗(yàn)。取出仔鼠海馬和大腦皮質(zhì)標(biāo)本,免疫組化、Western blot方法檢測(cè)腦海馬、大腦皮質(zhì)mGluR5和Homer-lb/c蛋白的表達(dá)的變化。
　　 結(jié)果:
　　 1、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對(duì)大鼠血鉛和腦海馬鉛含量的影響各慢性鉛暴露組仔鼠血鉛和腩海馬鉛含量明

5、顯高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對(duì)大鼠學(xué)習(xí)記憶能力的影響在水迷宮實(shí)驗(yàn)中,訓(xùn)練第四天開始,鉛暴露大鼠尋找平臺(tái)潛伏期延長(zhǎng),結(jié)果表明慢性鉛暴露可明顯損傷仔鼠的空問定位航行能力。
　　 3、發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對(duì)腦海馬和大腦皮質(zhì)mGluR5和Homer-1b/c蛋白表達(dá)的影響
　　 (1)免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示:對(duì)大鼠腦海馬和皮質(zhì)進(jìn)行免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn),檢測(cè)mGluR5的表達(dá)。在海馬的CA

6、3區(qū)和DG區(qū)PN7d、PN14d、PN21d和PN28d時(shí)各鉛暴露組的積分光密度值與對(duì)照組比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,即鉛暴露組該蛋白的表達(dá)含量低于對(duì)照組。大腦皮質(zhì)PN7d時(shí),低劑量1組相對(duì)于對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,低劑量2組與對(duì)照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,低于對(duì)照組;PN14d、PN21d和PN28d時(shí)各鉛暴露組相對(duì)于對(duì)照組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,低于對(duì)照組。
　　 (2)Western blot結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,發(fā)育期慢性低濃度鉛暴露對(duì)大鼠