不同水平鉛暴露對生長發(fā)育期小鼠學(xué)習記憶能力的影響.pdf

1、鉛是一種具有神經(jīng)毒性的重金屬,它作為一種礦藏廣泛存在于自然界,并以良好的柔性和抗腐蝕性得到在工業(yè)和日常生活中的廣泛應(yīng)用。鉛在環(huán)境中可長期蓄積造成污染,通過食物鏈、水、土壤和空氣進入人體。兒童是鉛污染的易感人群,鉛對兒童的生長發(fā)育和智力行為有嚴重的影響,可出現(xiàn)生長發(fā)育落后、智力下降、反應(yīng)遲鈍、多動和注意力集中障礙等癥狀。
　　一氧化氮(NO)被認為是典型的逆行信使分子,在學(xué)習和記憶中起重要作用,其生物合成主要受一氧化氮合酶(NOS)

2、的調(diào)節(jié),目前多以NOS活性來反映NO的含量。已知NOS有三種類型,分別為神經(jīng)元型NOS(nNOS)、誘導(dǎo)型NOS(iNOS)和內(nèi)皮型NOS(eNOS),其中nNOS和eNOS合稱為結(jié)構(gòu)型NOS(cNOS)。但目前研究對于鉛導(dǎo)致腦NO含量及NOS活性降低還是升高方面尚有爭議。
　　本研究擬對小鼠設(shè)立正常對照組和不同水平鉛暴露組,檢測小鼠的血鉛和組織鉛濃度、Morris水迷宮逃避潛伏期以及腦和血清NO含量、NOS活性的變化情況,探討不

3、同水平鉛暴露對生長發(fā)育期小鼠學(xué)習記憶能力的影響及腦NO、NOS和血清NO、NOS與小鼠學(xué)習記憶能力之間的聯(lián)系。
　　材料與方法：
　　1、動物模型制備及分組剛斷乳遠交群昆明小鼠120只,體重18g~22g,雌雄各半。以含醋酸鉛的飲水做鉛暴露源,設(shè)立0.3g/L組,1.0g/L組,3.0g/L組和正常對照組。每組30只小鼠,雌雄各半,分籠飼養(yǎng)。
　　2、標本的采取開始染鉛記為第0d。分別在第7、14和21d,對全部小鼠采

4、用尾部采血。采血后,每組隨機抽取10只小鼠,雌雄各半。斷頭采血,用于分離血清。解剖小鼠,分離腦、脾、腎、肝、肺和股骨,稱重后保存于-20℃冰箱。
　　3、小鼠體重的測定分別在第0、7、14、21d,用JJ200型精密電子天平測量每組小鼠體重。
　　4、小鼠血鉛和組織鉛濃度的測定用Z-5000石墨爐原子吸收光譜儀測小鼠血鉛和組織鉛濃度。
　　5、小鼠Morris水迷宮試驗的測定在第7、14和21d,每組隨機抽取小鼠10只

5、進行測試,3次訓(xùn)練后,測小鼠逃避潛伏期。
　　6、小鼠腦及血清NO含量、NOS活性的測定在第7、14和21d,用試劑盒測定腦和血清的NO含量,NOS活性。
　　7、統(tǒng)計學(xué)分析用SPSS12.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行方差分析、秩和檢驗(K-W檢驗)、多個樣本均數(shù)的兩兩比較(SNK法檢驗和Wilcoxon秩和檢驗)和相關(guān)分析。檢驗水準α=0.05。
　　結(jié)果：
　　1、鉛暴露對小鼠一般狀況的影響隨著鉛暴露時間的增加,

6、正常組小鼠體重呈升高趨勢,3組鉛暴露小鼠體重的增加較對照組緩慢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);各鉛暴露組小鼠的每周體重增長率隨鉛暴露時間增加均呈下降趨勢,均低于正常組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　2、鉛暴露對小鼠血鉛和組織鉛濃度的影響各鉛暴露組小鼠的血鉛、腦鉛和骨鉛濃度隨著鉛暴露時間和水平的增加均升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);肝鉛、腎鉛、脾鉛濃度隨著鉛暴露水平的增加均升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)

7、;肺鉛與正常組小鼠相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義。
　　3、鉛暴露對小鼠智力的影響
　　3.1 Morris水迷宮試驗隨著鉛暴露時間和水平的增加,各鉛暴露組小鼠的逃避潛伏期均增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.2鉛暴露對小鼠腦和血清NO、NOS的影響
　　3.2.1鉛暴露對小鼠腦NO、NOS的影響各鉛暴露組小鼠的腦NO含量隨著鉛暴露時間的增加呈下降趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);在同一時點,隨著鉛暴

8、露水平的增加,其含量亦呈下降趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。各鉛暴露組小鼠的腦總NOS、iNOS和cNOS活性,隨著鉛暴露時間的增加呈下降趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在同一時點,隨著鉛暴露水平的增加,腦總NOS呈下降趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);腦iNOS和腦cNOS活性變化趨勢不明顯。
　　3.2.2鉛暴露對小鼠血清NO、NOS的影響各鉛暴露組小鼠的血清NO含量隨著鉛暴露時間的增加呈下降趨勢,差異有

9、統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。隨著鉛暴露時間的增加,各鉛暴露組小鼠的血清總NOS和iNOS活性呈升高后又降低的趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);血清cNOS活性呈下降趨勢,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。在同一時點,隨著鉛暴露水平的增加,血清總NOS、iNOS和cNOS活性變化差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。
　　3.3相關(guān)分析小鼠血清cNOS活性,在第7d與血鉛濃度呈負相關(guān)(r=-0.316,P=0.047);在第14

10、和21d時,小鼠血清cNOS活性與與血鉛、腦鉛濃度及Morris水迷宮逃避潛伏期均呈負相關(guān)(r=-0.365,P=0.020;r=-0.361,P=0.022;r=-0.458,P=0.003;r=-0.731,P=0.000;r=-0.512,P=0.001;r=-0.698,P=0.000)。
　　結(jié)論1、隨著鉛暴露時間和水平的增加,小鼠體重增長越為遲緩。
　　2、小鼠的學(xué)習記憶能力隨鉛暴露時間和暴露水平增加而降低。