生長發(fā)育期鉛暴露致氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)損傷的研究.pdf

1、目的：通過建立生長發(fā)育期仔鼠鉛暴露模型，探討生長發(fā)育期鉛暴露對不同日齡的仔鼠血清中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。同時應(yīng)用現(xiàn)場調(diào)查，探討環(huán)境鉛暴露對兒童血鉛水平、血清中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量，并探討兒童血鉛水平與血清中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量以及神經(jīng)行為之間的關(guān)系，為尋找鉛暴露的早期效應(yīng)標(biāo)志物提供理論依據(jù)。
　　方法：1實驗動物分組：選取60只SPF級健康SD大鼠，雌雄各半，按雌：雄大鼠1:1比例進行單籠飼養(yǎng)交配，每日查看陰栓，觀察到陰栓后視為

2、該雌鼠懷孕，將孕鼠隨機分為2組，即對照組及醋酸鉛組。孕鼠自妊娠第1天連續(xù)給予醋酸鉛(100mg/kg)灌胃，至仔鼠離乳[出生后第21天(postnatal day21，PND21)]，離乳后的仔鼠繼續(xù)相同的處理至PND42；對照組給予10mg/kg生理鹽水；2隨機選擇年齡為0-6歲的656人，男童393名，女童263名，將所選兒童按年齡分為兩組：0-3歲組，4-6歲組；3應(yīng)用Mirrors水迷宮分別對醋酸鉛暴露組和對照組仔鼠進行神經(jīng)行為

3、學(xué)測試；4將Conners兒童行為量表與自行設(shè)計的調(diào)查問卷相結(jié)合，收集兒童的一般情況、生活和衛(wèi)生習(xí)慣、神經(jīng)行為信息；5應(yīng)用電感耦合等離子體質(zhì)譜儀（ICP-MS）對仔鼠及調(diào)查兒童血鉛水平進行檢測分析；6應(yīng)用高效液相色譜法（HPLC）對兒童血清和仔鼠海馬及血清中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量進行檢測；7統(tǒng)計學(xué)分析：實驗數(shù)據(jù)使用SPSS17.0軟件進行分析，數(shù)據(jù)均采用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示。各組別間的比較采用單因素方差分析（One Way ANOVA）檢驗，

4、兩兩比較采用t-test檢驗，相關(guān)性分析應(yīng)用person相關(guān)系數(shù)分析，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：1.醋酸鉛暴露對仔鼠的一般情況的影響：醋酸鉛組和對照組大鼠的飲水量均逐漸增加，但兩組仔鼠飲水量經(jīng)比較無明顯差異；兩組仔鼠體重均正常增長，且兩組間仔鼠體重變化無明顯差異；2.醋酸鉛暴露后對仔鼠學(xué)習(xí)記能力的影響：由Mirrors水迷宮的結(jié)果可以看出，醋酸鉛暴露組仔鼠（PND21、PND42）的逃逸潛伏期較對照組增長（P

5、<0.05），穿越平臺次數(shù)減少（P<0.05）；3醋酸鉛暴露后各日齡仔鼠血鉛水平的變化：與對照組相比，醋酸鉛暴露后仔鼠的血鉛水平顯著升高。醋酸鉛組PND1、PND2、PND42仔鼠血鉛含量是對照組血鉛含量的2.05倍、10.75倍、40.60倍，且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；4.醋酸鉛暴露對各日齡仔鼠血清及海馬中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響：與對照組比較，醋酸鉛組各日齡仔鼠血清及海馬中Glu含量均明顯升高，Ser含量、Gly含量和G

6、ABA含量顯著降低（P<0.05）；5.各氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)與仔鼠神經(jīng)行為的關(guān)系：仔鼠經(jīng)醋酸鉛染毒后，學(xué)習(xí)記憶能力與血清內(nèi)Glu、Ser、GABA的含量呈負相關(guān)，與Gly呈正相關(guān)；6.仔鼠血清與海馬組織中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的關(guān)系：仔鼠血清與海馬中氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量呈正相關(guān)Glu（r=0.606,P=0.019），Ser（r=0.384,P=0.033），Gly（r=0.377,P=0.040）， GABA（r=0.393,P=0.029

7、）；7.調(diào)查兒童血鉛水平：656名調(diào)查兒童血鉛平均水平為37.02±22.51μg/L，其中男童血鉛平均值為37.54±23.66μg/L，女童平均值為36.24±20.66μg/L；差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；小于3歲組兒童血鉛水平為38.06±23.19μg/L，3-6歲組兒童血鉛水平為35.67±21.56μg/L，兩組不同年齡兒童血鉛水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；8.氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量與兒童神經(jīng)行為的關(guān)系：兒童血

8、清中Glu含量與兒童沖動指數(shù)、焦慮指數(shù)及多動指數(shù)呈正相關(guān)；Ser含量與兒童焦慮指數(shù)呈負相關(guān)（P<0.05）；Gly含量與兒童焦慮指數(shù)呈負相關(guān)（P<0.05）；GABA含量與兒童沖動指數(shù)呈正相關(guān)（P<0.05）；9.影響氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的單因素分析：不同性別兒童血清中Gly的含量有明顯不同（P<0.05）；年齡對兒童血清中Glu的含量有明顯影響（P<0.05）；BMI指數(shù)對兒童血清中Glu、Ser和Gly含量均有影響（P<0.05）；

9、血鉛水平僅對兒童血清中Gly的含量存在明顯影響（P<0.001）；不同的飲食習(xí)慣對兒童血清中Glu、Ser和GABA的含量有明顯的影響（P<0.05）；不同生活習(xí)慣僅對兒童血清中Gly的含量有明顯影響（P<0.05）；家庭周圍有工廠或企業(yè)對兒童血清中四種氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)的含量均有明顯影響（P<0.001）；10.氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)含量的多因素分析：兒童的性別、年齡、BMI、衛(wèi)生習(xí)慣、飲食習(xí)慣、父母及家庭因素以及血鉛水平均會對血清中氨基酸類