重組腺病毒介導多藥耐藥相關(guān)蛋白反義RNA對人肝癌耐藥細胞株MDR表型逆轉(zhuǎn)的實驗研究.pdf

1、四川大學博士學位論文重組腺病毒介導多藥耐藥相關(guān)蛋白反義RNA對人肝癌耐藥細胞株MDR表型逆轉(zhuǎn)的實驗研究姓名：陳琳申請學位級別：博士專業(yè)：外科學指導教師：嚴律南20030422寬、高：待腫瘤之長、寬、高中任一值達5rnm時，予以ADM腹腔注射化療(8m∥蠔，1次／周3次)，每隔2日測量腫瘤長、寬、高，計算腫瘤體積。第四周處死動物終止觀察，計算體積及腫瘤抑制率。結(jié)果重組腺病毒AdEasy_GFP—ASmrp滴度可達25109efu／ml，M

2、OI為100時，即可致90％以上的肝癌細胞SMMC7721／ADM被感染。體外實驗中，重組腺病毒AdEasy—GFPASmrp(MOI=100)轉(zhuǎn)染后的人肝癌耐藥細胞SMMC一7721／ADM對ADM、DNR的IC50分別為O487ug／ml、O328ltg／rnl，RF分別為974倍、1093倍，Rf分別下降368倍和35，4倍。在轉(zhuǎn)染后24h，MRP之mRNA水平開始下降并呈持續(xù)下降趨勢(P005)。經(jīng)ADM化療后，A組腫瘤體積增長

3、較B、C兩組為慢，差異有統(tǒng)計學意義(P005)，治療結(jié)束后A組腫瘤相對于B組和C組其腫瘤抑制率分別為3298％、3459％，另外兩組之間上述各指標未見統(tǒng)計學差異。結(jié)論利用腺病毒AdEasy系統(tǒng)，可快速、簡便獲取高滴度的重組腺病毒。重組腺病毒介導的MRP反義RNA可有效封閉MRP基因表達，降低P190蛋白水平，在體外和體內(nèi)實驗中均能增加人肝癌耐藥細胞株SMMC7721／ADM對化療藥物的敏感性，對肝癌耐藥細胞的MDR表型有較好的逆轉(zhuǎn)作用，