胚胎干細(xì)胞同步化處理、神經(jīng)分化及Aβ對(duì)分化神經(jīng)元NFκB通路的影響.pdf

1、浙江大學(xué)博士學(xué)位論文胚胎干細(xì)胞同步化處理、神經(jīng)分化及Aβ對(duì)分化神經(jīng)元NFκB通路的影響姓名：章恩明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：生物醫(yī)學(xué)工程指導(dǎo)教師：鄭筱祥20050501浙江大學(xué)博士學(xué)位論文胞增殖活性及重入細(xì)胞周期后的細(xì)胞生長(zhǎng)特性重點(diǎn)探討了同步化對(duì)胚體形態(tài)及分化潛能性的影響，發(fā)現(xiàn)G0／G1期細(xì)胞拘捕能夠顯著提高EBs的分化潛能性，并且血清饑餓同步化產(chǎn)生的EBs具有較強(qiáng)的神經(jīng)元分化能力。此外，通過(guò)對(duì)bFGF觸發(fā)不同分化階段的神經(jīng)元細(xì)胞的Glu

2、釋放及胞內(nèi)鈣離子濃度變化的研究，分析了在ESC誘導(dǎo)分化神經(jīng)元各個(gè)階段bFGF、高鉀、NGF目IJ激后Glu釋放量的變化，以及Glu釋放引起胞內(nèi)[ca21的變化。結(jié)果顯示bFOF能在1—2分鐘內(nèi)引起Glu的釋放以及胞內(nèi)[Ca2】的升高，并影響分化神經(jīng)元的興奮性。由于bF(疆觸發(fā)的神經(jīng)元胞內(nèi)【ca2】的升高能被GIu受體拮抗劑MK801抑制，因此，bFGF在影響ESC分化為神經(jīng)元的過(guò)程中不僅具有神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)作用還可能發(fā)揮潛在的神經(jīng)刺激劑的作用。

3、最后，利用’AB處理不同分化階段的神經(jīng)元細(xì)胞，分析了NFgB因子與核內(nèi)DNA結(jié)合情況，并研究了AB作為NFrB活化的潛在誘導(dǎo)物對(duì)從ESC分化出來(lái)的神經(jīng)元細(xì)胞的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ADl—42對(duì)于分化早期(分化12天以前)的神經(jīng)元沒(méi)有影響，在ESC誘導(dǎo)分化12天以后的神經(jīng)元中，細(xì)胞NFKB通路能被ABl啦激活，Rel家族蛋白p65和p50參與活化，并伴隨神經(jīng)元細(xì)胞存活率降低。表明，AB對(duì)分化不同階段的神經(jīng)元細(xì)胞的NFKB活化有選擇性。本文以E

4、SC體外誘導(dǎo)分化神經(jīng)元細(xì)胞的模式為基礎(chǔ)，探討了分化過(guò)程中的因素如細(xì)胞周期、生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)神經(jīng)分化的影響，并將此分化模型初步應(yīng)用于AD致病機(jī)制的分析。其創(chuàng)新性主要為以下三點(diǎn)：一、發(fā)現(xiàn)血清饑餓拘捕ESC進(jìn)入G0／G1后，增強(qiáng)TEBs的分化潛能性，提高了神經(jīng)分化能力。二、發(fā)現(xiàn)bFGF在ESC分化初期除了作為營(yíng)養(yǎng)因子外的潛在興奮性作用。三、發(fā)現(xiàn)A0能夠有選擇地活化ESC早期分化的神經(jīng)元中的NF出通路。關(guān)鍵詞：胚胎干細(xì)胞；神經(jīng)元；分化；胚