雙指標化學(xué)發(fā)光免疫分析法早期診斷腦部疾病.pdf

1、隨著人類基因組測序的完成,惡性疾病研究的重點從基因組學(xué)轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)組學(xué)研究中。蛋白質(zhì)多組分同時檢測已成為當前生物分析檢測的熱點,在臨床診斷、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用。與傳統(tǒng)平行單一組分分析相比,多組分同時測定具有樣品通量高,分析效率高,樣本需求少,檢測成本低等優(yōu)點。生物標志物一般定義為疾病發(fā)生、發(fā)展過程中表達量發(fā)生變化的生物分子,可反映疾病發(fā)展的程度、治療效果和預(yù)測重復(fù)發(fā)病率。理想的標志物檢測技術(shù)可以在復(fù)雜生物樣品中同時實現(xiàn)多個組分

2、的高靈敏度檢測。
　　化學(xué)發(fā)光免疫分析法作為一種廣泛發(fā)展的分析技術(shù),兼有免疫反應(yīng)的特異性和化學(xué)發(fā)光分析的高靈敏度。本文利用辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷酸酯酶(ALP)催化發(fā)光方法,發(fā)展了兩種不同模式的雙指標同時檢測的化學(xué)發(fā)光免疫分析新技術(shù),應(yīng)用于腦部疾病(腦膠質(zhì)瘤和腦卒中)血清標志物分析。論文分為以下三個部分:
　　(1)綜述目前多組分檢測技術(shù)的進展,包括基于標記物識別模式的多組分檢測和基于空間位置識別模式的多組分檢測,

3、后者包括芯片技術(shù)和編碼微球技術(shù)等。
　　(2)以聚苯乙烯微孔板為載體,HRP和ALP雙標記,構(gòu)建腦膠質(zhì)瘤特異性抗原NSE和CA15-3雙指標化學(xué)發(fā)光免疫分析法。檢測NSE和CA15-3的線性范圍分別為O.2～10ng/mL,(R2＞0.99)和0.2～1OU/mL(R2＞0.99),最低檢測限分別為0.2ng/mL和0.2U/mL。制備高、中、低濃度的三個模擬血清樣本,回收率良好,兩種蛋白檢測無交叉干擾,有望為腦膠質(zhì)瘤的臨床早期診

4、斷提供堅實的支持。
　　(3)以磁性微球為載體,構(gòu)建了一種磁分離雙組分化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù),測定腦卒中特異性抗原S100β和NSE,均相免疫反應(yīng),磁性微球快速分離,雙組分之間不存在交叉反應(yīng),對S100β和NSE的檢測線性范圍分別為0.02～1ng/mL(R2＞0.99)和1～20ng/mL(R2＞0.99),最低檢測限分別為0.005ng/mL和0.2ng/mL。實驗考察了血清對抗原檢測靈敏度的影響,結(jié)果表明:此法回收率和重現(xiàn)性良