獲得性再生障礙性貧血患者Shelterin、TERT基因表達(dá)及其與中醫(yī)證型關(guān)系的研究.pdf

1、目的:對(duì)獲得性再生障礙性貧血患者外周血單個(gè)核細(xì)胞的端粒保護(hù)蛋白復(fù)合體shelterin及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶TERT的表達(dá)水平進(jìn)行研究,探討它們之間及與獲得性再障的關(guān)系,并研究它們與再障辨證分型之間的關(guān)系,以期為再障的發(fā)生發(fā)展、治療及預(yù)后提供更準(zhǔn)確的依據(jù)。方法:收集60例符合納入標(biāo)準(zhǔn)的獲得性再障患者(其中慢性再障52例,急性再障8例;中醫(yī)辨證分型的急勞髓枯型8例,腎陽虛型18例,腎陰虛型19例,腎陰陽兩虛型15例)的外周血單個(gè)核細(xì)胞,提取RN

2、A,并記錄其血常規(guī)情況。另收集20例健康人外周血單個(gè)核細(xì)胞標(biāo)本做正常對(duì)照。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative polymerase chain reaction, RT-qPCR)檢測端粒保護(hù)蛋白復(fù)合體shelterin的六個(gè)蛋白TRF1、TRF2、RAP1、TIN2、TPP1和POT1及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)在獲得性再障和正常對(duì)照組外周血單個(gè)核細(xì)胞中的mRNA表達(dá)情況,分析其與外周血白細(xì)胞以

3、及相互之間的表達(dá)相關(guān)性。結(jié)果:1、獲得性再障患者TRF1、RAP1mRNA表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯升高,均有顯著性差異(TRF1,P<0.01;RAP1,P<0.05);TRF2、POT1、TIN2mRNA表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯降低(POT1、TRF2,P<0.01;TIN2,P<0.05)。2、急性再障、慢性再障患者TRF1、RAP1mRNA表達(dá)情況均較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05);急性再障、慢性再障患者TIN2、POT1mR

4、NA表達(dá)情況均較正常對(duì)照組明顯降低(P<0.05);急性再障患者TRF2mRNA表達(dá)情況較正常對(duì)照組顯著降低(P<0.05);急性再障患者TIN2mRNA表達(dá)情況較慢性再障患者明顯降低(P=0.039,P<0.05)。3、中醫(yī)辨證分型的腎陰虛型、急癆髓枯型患者TRF1、RAP1mRNA的表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯升高(P<0.05);腎陰虛型TRF2、TIN2、POT1mRNA的表達(dá)水平較正常對(duì)照組明顯降低(TRF2、POT1,P<0.0

5、5;TIN2,P<0.01);腎陰陽兩虛型和急癆髓枯型獲得性再障患者TIN2、POT1mRNA的表達(dá)水平均較正常對(duì)照組明顯降低(P<0.05)。4、中醫(yī)各證型間,腎陰虛型、腎陰陽兩虛型、急癆髓枯型患者TIN2mRNA表達(dá)水平均較腎陽虛型明顯降低(腎陰虛型P=0.027,P<0.05;腎陰陽兩虛型P=0.016,P<0.05;急癆髓枯型P=0.002,P<0.01);腎陰虛型患者TPP1mRNA表達(dá)水平較腎陽虛型患者明顯降低(P=0.04

6、1,P<0.05);腎陽虛型患者TERTmRNA表達(dá)水平較腎陰虛型、腎陰陽兩虛型、急癆髓枯型患者明顯升高(P<0.05)。5、TIN2mRNA表達(dá)水平與白細(xì)胞及淋巴細(xì)胞有明顯相關(guān)性;POT1mRNA表達(dá)水平與年齡有明顯相關(guān)性;TERT mRNA表達(dá)水平與紅細(xì)胞及血紅蛋白有明顯相關(guān)性。6、TERT與TRF1、TPP1、POT1mRNA表達(dá)水平之間存在相關(guān)性;TRF2與TPP1、POT1、RAP1、TIN2mRNA表達(dá)水平之間存在相關(guān)性;T

7、PP1與TERT、TRF2、POT1、RAP1mRNA表達(dá)水平之間存在相關(guān)性;TIN2與TRF1、TRF2、POT1mRNA表達(dá)水平之間存在相關(guān)性。結(jié)論:1、端粒保護(hù)蛋白shelterin組分的TRF1、TRF2、TIN2、POT1、RAP1以及端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)水平的改變可能在獲得性再障的發(fā)病中起一定作用;并且TIN2、POT1、TERT可能與獲得性再障的發(fā)病關(guān)系更密切。2、TRF1、RAP1在腎陰虛型最高,在腎陽虛型最低;T