2,5-己二酮對成年大鼠海馬神經(jīng)元及其再生的影響.pdf

1、哺乳動物的大腦終生存在著神經(jīng)元再生，并且主要分布在兩個部位:側(cè)腦室的腦室下區(qū)與海馬齒狀回的顆粒細胞亞層。成年大腦中的神經(jīng)元再生，尤其是海馬部位的神經(jīng)元再生，對于調(diào)控生理環(huán)境及病理情況下大腦的功能有重要作用。海馬是邊緣系統(tǒng)的一部分，其神經(jīng)元再生在調(diào)控情感狀態(tài)、情緒、學(xué)習、記憶中至關(guān)重要。神經(jīng)元再生是一個動態(tài)過程，包括神經(jīng)干細胞或神經(jīng)前體細胞的增殖、分化、形態(tài)發(fā)生、成熟、整合到已存在的神經(jīng)環(huán)路發(fā)揮其功能。神經(jīng)元再生的每個階段均易受到許多內(nèi)在

2、、外在因素的影響。正己烷是一種脂質(zhì)化合物，在多個行業(yè)中被廣泛使用，同時也是具有聚集作用的神經(jīng)毒物，而2，5-己二酮作為其主要的神經(jīng)毒代謝物，有研究發(fā)現(xiàn)它可以導(dǎo)致小鼠海馬齒狀回新生細胞數(shù)量的減少以及大鼠空間記憶力的降低，慢性2，5-己二酮暴露可以引起中樞和外周神經(jīng)系統(tǒng)的運動神經(jīng)元軸索萎縮，而這種萎縮與神經(jīng)元骨架蛋白的表達有關(guān)，神經(jīng)絲是神經(jīng)元骨架蛋白的主要成分，大量實驗已經(jīng)證實正己烷的長期暴露可以導(dǎo)致神經(jīng)組織（皮質(zhì)，脊髓，坐骨神經(jīng)，脛神經(jīng)）

3、神經(jīng)絲含量的降低。但是2，5-己二酮對海馬部位神經(jīng)絲表達的影響和對成年神經(jīng)前體細胞的自我更新以及分化成神經(jīng)元的影響還沒有報道過。
　　目的:
　?、倮?，5-己二酮暴露大鼠模型，研究2，5-己二酮對成年大腦皮質(zhì)、海馬部位神經(jīng)絲表達的影響。
　?、诶?，5-己二酮暴露大鼠模型，研究2，5-己二酮對成年海馬齒狀回神經(jīng)元再生過程的影響。
　　方法:
　　將成年SD大鼠按體重隨機分為3組，分別為對照組、中劑量組

4、、高劑量組。中劑量組和高劑量組分別每天腹腔注射2，5-己二酮200mg/kg，400mg/kg體重。注射5周，每周5次，周一至周五，每周進行一次稱重。實驗過程中小鼠自由飲水，進食。實驗動物的飼養(yǎng)按照大連醫(yī)科大學(xué)實驗動物管理條例實行。2，5-己二酮暴露5周后，分離皮質(zhì)、海馬，利用Western blot檢測其NF-L(Neurofilament-light，低分子量神經(jīng)纖維)的表達水平。取大鼠大腦組織的冰凍切片做免疫熒光，檢測各組海馬新生

5、細胞的數(shù)量，計數(shù)各組新生的Sox2+[SRY(sex-determining regionY)-box2]的細胞占新生細胞的百分比和新生神經(jīng)元占新生細胞的百分比。
　　結(jié)果:
　　1.Westem blot結(jié)果顯示:不同劑量的2，5-己二酮暴露相同的時間，對大鼠皮質(zhì)和海馬的NF-L的表達影響不同。與對照組的皮質(zhì)NF-L表達相比，中劑量組的表達顯著降低(1.00 vs.0.72±0.06，p＜0.01)，高劑量組也顯著降低(1

6、.00vs.0.47±0.06，p＜0.01)，而且高劑量組比中劑量組降低明顯(0.47±0.06 vs.0.72±0.06，p＜0.01)。在海馬，中劑量組和對照組的NF-L的表達沒有明顯差異(0.88±0.09 vs.1.00，p＞0.05)，但是高劑量的大鼠NF-L較對照組明顯降低(0.55±0.06vs.1.00，p＜0.01)，比中劑量組也顯著降低(0.55±0.06 vs.0.88±0.09，p＜0.01)。
　　2.

7、免疫熒光結(jié)果顯示:與對照組相比，中劑量組的大鼠沒有明顯的改變，然而高劑量的2，5-己二酮暴露造成大鼠海馬新生細胞數(shù)量顯著降低(14±1.0 vs.8±0.9/切片，p＜0.01);分化成新生神經(jīng)元的百分比顯著降低(27±0.8 vs.16±1.8％，p＜0.01);同時新生Sox2+細胞的百分比明顯增高(54±2.8 vs.70±1.9％，p＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　暴露于高劑量2，5-己二酮的環(huán)境中，導(dǎo)致成年大鼠皮質(zhì)