四川省畜禽動(dòng)物源大腸桿菌質(zhì)粒介導(dǎo)16S rRNA甲基化酶耐藥基因檢測(cè).pdf

1、隨著畜禽養(yǎng)殖業(yè)的規(guī)模化和集約化，各種應(yīng)激因素增多，導(dǎo)致感染性疾病的發(fā)病率和死亡率居高不下。氨基糖苷類藥物作為控制畜禽感染性疾病的主要藥物，細(xì)菌已對(duì)該類藥物產(chǎn)生了耐藥性。近年來研究顯示，質(zhì)粒介導(dǎo)的16S rRNA甲基化酶能保護(hù)細(xì)菌30S核糖體16S rRNA，使藥物與之不能結(jié)合，介導(dǎo)對(duì)包括阿貝卡星在內(nèi)的氨基糖苷類高水平耐藥。大腸桿菌作為畜禽腸道重要棲居菌和病原菌，承受著各種藥物選擇壓力，形成了多種耐藥基因儲(chǔ)庫(kù)，故對(duì)其耐藥性進(jìn)行檢測(cè)，可以了

2、解耐藥性的流行規(guī)律，預(yù)測(cè)耐藥性的發(fā)展趨勢(shì)，為評(píng)估抗菌藥物使用風(fēng)險(xiǎn)，以及臨床合理使用抗菌藥物提供科學(xué)依據(jù)。
　　本研究采用了Kirby-Bauer方法和PCR-測(cè)序法，檢測(cè)了519株動(dòng)物源大腸桿菌（437株共生菌和82株臨床菌）對(duì)14種抗菌藥物的藥物敏感性，以及菌株質(zhì)粒介導(dǎo)16S rRNA甲基化酶基因。藥敏結(jié)果顯示，437株共生菌對(duì)14種抗菌藥物表現(xiàn)出耐藥性，其中對(duì)3種氨基糖苷類耐藥性較低（耐藥率2.98％～30.9％）;對(duì)其余11

3、種非氨基糖苷類藥物呈不同耐藥水平，其中對(duì)美羅培蘭敏感(耐藥率0.46％)，對(duì)氨芐西林(69.79％)、復(fù)方新諾明耐藥嚴(yán)重(68.72％);71.12％菌株呈多重耐藥性，以3～5耐菌株所占比例最高(31.58％)，耐藥譜型寬，有108種耐藥譜型。
　　82株臨床菌株對(duì)14種抗菌藥物表現(xiàn)出不同水平耐藥性，其中對(duì)卡那霉素、慶大霉素和阿米卡星3種氨基糖苷類耐藥性較高，分別為100％、89.02％和32.93％;對(duì)其余11種非氨基糖苷類藥物

4、也呈不同耐藥水平，其中除對(duì)美羅培蘭敏感（耐藥率3.66％），其余耐藥率高達(dá)79.27％以上;100％菌株呈多重耐藥性，以10～13耐菌株所占比例最高(84.14％)，有23種耐藥譜型，優(yōu)勢(shì)耐藥譜型AMP/A/C/CFZ/CTR/CTX/CN/CHL/DOX/NAL/CIP/SXT/KAN。
　　對(duì)耐氨基糖苷類的134株共生菌和82株臨床菌株，進(jìn)行了16S rRNA甲基化酶基因（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rm

5、tE、npmA）的PCR及PCR-測(cè)序檢測(cè)。PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，134株共生菌株中，5株攜帶rmtB基因(檢出率3.73％)，尚未檢出armA、rmtA、rmtC、rmtD、rmtE、npmA;82株臨床菌中，10株含rmtB基因(12.20％)，1株含有rmtA(1.22％)，且以rmtB和rmtA共存在。
　　對(duì)菌株耐藥表型與基因型比較結(jié)果顯示，菌株攜帶的基因型與耐藥表型不完全一致，如有些菌株攜帶armA和rmtB基因，卻對(duì)阿

6、米卡星呈敏感性。
　　以上結(jié)果表明，本次檢測(cè)的動(dòng)物源大腸桿菌，無論共生菌還是臨床菌株對(duì)抗菌藥物表現(xiàn)不同程度的耐藥性，且多重耐藥性較嚴(yán)重。養(yǎng)殖業(yè)和獸醫(yī)臨床應(yīng)謹(jǐn)慎使用抗菌藥物;耐氨基糖苷類大腸桿菌菌株中主要攜帶rmtB和armA基因，流行率低;菌株攜帶16S rRNA甲基化酶基因與菌株來源有關(guān)，臨床菌株攜帶相關(guān)耐藥基因比共生菌復(fù)雜;菌株攜帶基因型與耐藥表型不完全一致，陽性菌株對(duì)抗菌活性高或獸醫(yī)臨床不使用藥物耐藥性顯著高于陰性菌，反之菌