黃芩苷對小鼠子宮組織經(jīng)典Wnt通路相關(guān)物質(zhì)表達(dá)的影響.pdf

1、黃芩苷(Baicalin)是從中藥黃芩中提取的一種黃酮類化合物，具有明顯的促進胚泡著床和保胎作用，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于臨床。目前對于黃芩苷保胎作用機理的認(rèn)識主要有以下幾方面:第一，黃芩苷可以直接或間接調(diào)節(jié)哺乳動物體內(nèi)Th1與Th2型免疫細(xì)胞的細(xì)胞因子含量，使機體免疫平衡向有利于胚泡附著的方向傾斜;第二，對體內(nèi)雌、孕激素含量及其受體起到一定的影響作用，改善子宮內(nèi)膜的生理環(huán)境，為胚泡的植入創(chuàng)造有利條件;第三，對多種因素引起的子宮平滑肌收縮有一定的

2、抑制作用，減少了因為早期胚泡著床不穩(wěn)定而造成的流產(chǎn)。但是，黃芩苷是否通過與胚泡著床有密切聯(lián)系的Wnt通路發(fā)揮作用，目前還未見報道。妊娠是一個調(diào)動機體多方面生理機能的復(fù)雜生物學(xué)過程，為了更加深入的探究黃芩苷發(fā)揮保胎作用的分子機理，我們開展了本次實驗。
　　 實驗選取了性成熟、體成熟的昆明系雌、雄小白鼠，將成功交配的雌鼠記為妊娠第1天并隨機分為四組:空白對照組、黃芩苷組、米非司酮組及黃芩苷+米非司酮組。于妊娠d2～8天，黃芩苷組小鼠

3、給予黃芩苷，米非司酮組給予米非司酮，黃芩苷+米非司酮組給予黃芩苷和米非司酮，空白對照組則給予黃芩苷和米非司的溶劑。在妊娠d8進行妊娠率與著床胚泡數(shù)的統(tǒng)計。于妊娠d3～8天，采集血液樣本，采用放射免疫法檢測小鼠血清中雌二醇和孕酮的含量;采集子宮組織，抽提總RNA，采用qRT-PCR法檢測β-catenin、LRP6、Dkk1和Wnt4基因相對表達(dá)水平;提取子宮組織總蛋白，采用Western-blotting法檢測β-catenin、LRP

4、6、Dkk1和Wnt4蛋白表達(dá)水平。
　　 結(jié)果表明黃芩苷引起圍著床期的小鼠血清中雌二醇含量下降(P＜0.05)，抑制給予米非司酮引起的雌二醇含量的升高(P＜0.01)。黃芩苷使圍著床期小鼠血清中孕酮含量升高(P＜0.05)，改善因米非司酮引起的孕酮含量的降低(P＜0.05)。與對照組相比，黃芩苷引起子宮組織中Dkk1 mRNA表達(dá)水平在d4～8顯著降低(P＜0.05)，而Wnt4 mRNA水平在d3～8顯著升高(P＜0.01)

5、;β-catenin mRNA表達(dá)水平在d3～8顯著升高(P＜0.01);LRP6 mRNA表達(dá)水平在d3～7顯著升高(P＜0.01)。Western-blotting實驗結(jié)果表明，黃芩苷使小鼠子宮組織中β-catenin蛋白表達(dá)量在d4～7顯著升高(P＜0.05)，LRP6在d4～8顯著升高(P＜0.05)，Dkk1在d6～8顯著下降(P＜0.05)。
　　 本研究運用米非司酮建立了小鼠胚泡著床障礙的模型，探討了黃芩苷對小鼠妊