黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎牙周組織及外周血中BMP-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的:牙周病是口腔的常見(jiàn)病與多發(fā)病，是造成成年人牙齒脫落的主要原因，同時(shí)它還是心血管疾病、糖尿病、新生兒早產(chǎn)等疾病的高危因素。牙周病是侵犯牙周組織的慢性進(jìn)行性炎癥，是一種由細(xì)菌感染而引起的破壞性疾病，細(xì)菌、菌斑以及其代謝產(chǎn)物是其主要的致病因素。牙周病的主要特征為牙齦炎癥、牙周附著喪失、牙周袋形成、牙槽骨吸收、牙齒松動(dòng)甚至脫落等。因此，牙周病治療的關(guān)鍵是消除牙齦炎癥，促進(jìn)已破壞和吸收的牙槽骨再生，恢復(fù)牙齒及牙周組織的正常功能。目前，牙周病

2、的治療方法有很多，臨床上主要以牙周基礎(chǔ)治療為主，同時(shí)配合全身或者局部使用抗生素。這種方法雖取得了一定的成效，卻未達(dá)到理想效果，并且長(zhǎng)期全身應(yīng)用抗生素可能會(huì)造成菌群失調(diào)、產(chǎn)生耐藥性等不良后果。因此，尋求一種既有抗菌、消炎作用，又能促進(jìn)牙周組織再生的藥物是眾多學(xué)者研究的方向。中藥因?qū)θ梭w刺激小、毒副作用小、成本低等特點(diǎn)得到了人們的關(guān)注，國(guó)內(nèi)外學(xué)者在中藥應(yīng)用于牙周病治療方面進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)了黃芩苷對(duì)牙周致病菌有明顯的的抑制作用，并且可以

3、促進(jìn)成骨細(xì)胞、牙周膜成纖維細(xì)胞(PDLFs)、牙周膜細(xì)胞(PDLCs)等促進(jìn)牙周組織再生的細(xì)胞生長(zhǎng)。骨形態(tài)發(fā)生蛋白2（BMP-2）是目前研究認(rèn)為與牙周組織再生密切相關(guān)的一種因子，本實(shí)驗(yàn)通過(guò)探討黃芩苷對(duì)實(shí)驗(yàn)性牙周炎大鼠牙周組織及外周血中BMP-2表達(dá)的影響，進(jìn)一步研究黃芩苷在牙周炎牙周組織再生中的作用以及對(duì)牙周炎的治療機(jī)制。
　　方法:取46只SD雄性大鼠，隨機(jī)取8只為空白對(duì)照組，脂多糖(LPS)局部滴注法建立大鼠牙周炎模型，模型成

4、立后，隨機(jī)分為4組，牙周炎模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、黃芩苷低濃度組、黃芩苷高濃度組。治療一個(gè)月后，分別頸總動(dòng)脈取各大鼠外周血，然后處死各大鼠，分別取其實(shí)驗(yàn)牙區(qū)骨段并制作牙體牙周組織聯(lián)合切片后，常規(guī)HE染色觀察各組大鼠牙周組織形態(tài)學(xué)改變，免疫組化法檢測(cè)大鼠牙周組織中BMP-2的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)法檢測(cè)各組大鼠血清中BMP-2、骨堿性磷酸酶(BALP)的表達(dá)情況。取實(shí)驗(yàn)部位牙齦組織提取組織蛋白，運(yùn)用蛋白質(zhì)免疫印跡(WB)的方法檢

5、測(cè)BMP-2的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　(1)臨床表現(xiàn)和病理結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組相比，牙周炎模型組大鼠出現(xiàn)明顯的牙周組織炎癥癥狀，牙周支持組織破壞嚴(yán)重，用藥干預(yù)后，治療組大鼠牙周組織炎癥明顯減輕，牙周組織成纖維細(xì)胞、成骨細(xì)胞生長(zhǎng)活躍，破骨細(xì)胞及骨陷窩減少，修復(fù)再生作用明顯。
　　(2)免疫組化結(jié)果顯示，各組大鼠牙周組織均出現(xiàn)BMP-2陽(yáng)性表達(dá)，黃芩苷高濃度組與陽(yáng)性對(duì)照組陽(yáng)性染色最明顯，二者與對(duì)照組和模型組相比存在明顯差

6、異，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;黃芩苷低濃度組與模型組相比，陽(yáng)性染色結(jié)果無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;但其與空白對(duì)照組相比差異明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(3) Western blot結(jié)果顯示，黃芩苷高濃度組大鼠牙齦組織中BMP-2含量明顯高于模型組，但與空白對(duì)照組之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;模型組、辛伐他汀組和黃芩苷低濃度組大鼠牙齦組織中BMP-2表達(dá)量略低于空白對(duì)照組，但它們四者之間差異沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　(4)酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）結(jié)果顯

7、示，與空白對(duì)照組比較，模型組大鼠血清BMP-2、BALP含量顯著升高;與模型組相比，辛伐他汀明顯增高血清中BMP-2的含量，但對(duì)BALP的含量的影響與模型組比較沒(méi)有顯著性差異;黃芩苷低、高濃度組均可明顯升高血清中BMP-2、BALP含量，但黃芩苷低濃度組與模型組比較沒(méi)有顯著差異。
　　結(jié)論:
　　(1)通過(guò)齦溝底部滴注內(nèi)毒素脂多糖的方法成功建立實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎模型
　　(2)黃芩苷能夠增加實(shí)驗(yàn)性大鼠牙周炎牙周組織中BM