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1、目的:通過(guò)實(shí)驗(yàn)觀察抗疏健骨顆粒對(duì)去勢(shì)大鼠骨組織形態(tài)及BMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)的影響,研究抗疏健骨顆粒對(duì)絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的作用機(jī)理,為抗疏健骨顆粒用于臨床治療絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:實(shí)驗(yàn)依照體重分層,每層依據(jù)隨機(jī)分組的方法,將60只雌性大鼠分成五組,分別為假手術(shù)組、模型組、抗疏健骨顆粒大、中、小劑量組。采用大鼠絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥經(jīng)典造模方式“摘除雙側(cè)卵巢”,制造絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型:將抗疏健骨顆粒大、中、小劑量
2、組及空白對(duì)照組大鼠采用去勢(shì)法造絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型。為排除手術(shù)因素影響,設(shè)立假手術(shù)組,通過(guò)在雙側(cè)卵巢位置附近取等大小脂肪組織一塊兒方法造模。造模成功一周后,灌胃給藥??故杞」穷w粒大劑量組給予2.86g/kg抗疏健骨顆粒、抗疏健骨顆粒中劑量組給予1.43g/kg抗疏健骨顆粒、抗疏健骨顆粒小劑量組給予0.71g/kg抗疏健骨顆粒,使用時(shí)加蒸餾水將抗疏健骨顆粒配制成不同藥物濃度混懸液灌胃;假手術(shù)組和模型組分別給予2ml生理鹽水灌胃。12周后取
3、材。取右側(cè)股骨上1/3段。取材后脫頸處死。HE染色法觀察病理情況,免疫組化法觀察BMP-2、MMP-9表達(dá)情況。結(jié)果用SPSS19.0軟件分析。
結(jié)果:骨組織形態(tài):空白模型組右股骨骨小梁變細(xì)、斷裂,數(shù)量減少,排列疏松紊亂??故杞」穷w粒組比較空白組骨小梁變粗變密,骨的連續(xù)性好,排列尚規(guī)則,成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。假手術(shù)組骨小梁分布均勻,骨連續(xù)性好。骨小梁厚度(Tb.Th)與平均骨體積分?jǐn)?shù)(BV/TV):假手術(shù)組與空白組相比較,P<0.05有
4、差異性。大、中、小劑量組同空白組相比較結(jié)果升高,P<0.05有差異性??故杞」穷w粒中劑量組與大、小劑量組比較,P<0.05有差異性。BMP-2:模型組BMP-2蛋白表達(dá)較假手術(shù)組降低(P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,抗疏健骨顆粒各治療組BMP-2較模型組中含量升高(P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,各用藥劑量治療組之間比較,中劑量組BMP-2蛋白含量最高(P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;MMP-9蛋白含量:空白模型組MMP-9含量較假手術(shù)組升高(P<
5、0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,抗疏健骨顆粒各治療組MMP-9含量較模型組減低(P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,各用藥劑量組之間比較,中劑量組MMP-9含量最低(P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:卵巢摘除后可形成絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥模型,絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者骨形態(tài)發(fā)生改變,且在骨組織中有BMP-2、MMP-9蛋白表達(dá)。絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥患者骨密度降低,骨小梁體積下降,骨組織中MMP-9蛋白表達(dá)呈升高趨勢(shì),BMP-2蛋白表達(dá)呈下降趨勢(shì)。抗疏健骨
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