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1、目的:器官移植已成為許多實(shí)質(zhì)器官終末期疾病唯一有效的治療方法,但仍面臨著許多挑戰(zhàn)。慢性移植物失功(chronicgraftdysfunction,CGD)是影響移植器官和移植受者長(zhǎng)期存活的最主要因素之一,原因不甚清楚。急性排斥與CGD關(guān)系密切。絕大多數(shù)移植術(shù)前都針對(duì)MHC重要位點(diǎn)進(jìn)行配型,但CGD仍然不可避免,推測(cè)目前配型尚未涉及的mHC(minorMHC)、nonMHC和MIC可能對(duì)CGD起一定作用。MIC(MHCclassIchai
2、n-relatedantigen)是一種誘生性抗原,與NKG2D受體結(jié)合可激活多種免疫細(xì)胞,從而引發(fā)天然免疫和特異性免疫反應(yīng)。小鼠H60(minorHantigen60)和Rae-1(theretinoicacidearlymolecules)與人類MIC功能相似。但其在移植免疫,特別是實(shí)體器官移植中的作用還未闡明。本研究選擇兩種經(jīng)典的急性排斥模型,擬檢測(cè)小鼠MIC在移植心臟和皮膚的表達(dá),環(huán)孢素(cyclosporinA,CsA)對(duì)MI
3、C表達(dá)的影響,探討MIC在急性排斥中的作用和對(duì)后期CGD的影響,及不同“應(yīng)激”刺激對(duì)MIC表達(dá)的影響。 方法:建立雌性昆明小鼠同種異體血管化袖套法小鼠頸部心臟移植模型,分為對(duì)照組(單純手術(shù))和干預(yù)組(手術(shù)+CsA40mg/Kg.d)2組。采集2組術(shù)后1、3、5、7天移植心臟,HE染色觀察不同時(shí)間點(diǎn)移植心臟病理變化;RT-PCR檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)H60和Rae-1的mRNA表達(dá);免疫組織化學(xué)檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)移植心臟的H60蛋白表達(dá)。建立
4、雌性昆明小鼠同種異體的皮膚移植模型,采集術(shù)后1、3、5、7天移植皮膚,RT-PCR檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)H60和Rae-1的mRNA表達(dá)。結(jié)果:正常心臟切片中心肌細(xì)胞排列整齊,血管周圍無(wú)淋巴細(xì)胞浸潤(rùn);對(duì)照組心肌細(xì)胞變性壞死,血管周圍及間質(zhì)中有大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);干預(yù)組心肌間質(zhì)中有少量炎性細(xì)胞浸潤(rùn),較對(duì)照組輕。 RT-PCR檢測(cè)顯示對(duì)照組心臟組織H60的mRNA于術(shù)后第5天出現(xiàn),第7天呈上升趨勢(shì);干預(yù)組于術(shù)后第3天出現(xiàn),第5天達(dá)峰(但低于對(duì)
5、照組表達(dá)水平),第7天下降。各時(shí)間點(diǎn)均未檢測(cè)到Rae-1mRNA表達(dá)。 免疫組織化學(xué)檢測(cè)顯示對(duì)照組術(shù)后第7天有H60的表達(dá),其余各時(shí)間點(diǎn)和干預(yù)組均未檢測(cè)到H60的表達(dá)。 皮膚移植術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)均未檢測(cè)到H60和Rae-1mRNA的表達(dá)。 結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)首次在昆明小鼠移植心臟中檢測(cè)到MIC的表達(dá)及變化情況。H60在移植心臟術(shù)后第5天上調(diào)表達(dá),提示MIC可能參與急性排斥或CGD早期階段。干預(yù)組H60表達(dá)時(shí)間提前,峰值下降
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