版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
1、背景和目的:
套細胞淋巴瘤(MCL)是一類少見的小B細胞非霍奇金淋巴瘤(NHL),其特征是t(11;14)(q13;q32)異常和細胞周期蛋白D1(cyclinD1)的過表達。近期研究發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中起到重要作用的SOX11基因在MCL中高表達,且不依賴于cyclinD1的表達水平,但其預后價值尚不明確;本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)微小RNA-223(miR-223)的表達水平在MCL中明顯下調(diào)。由此我們推測SOX11可能
2、通過miR-223的調(diào)控作用而參與MCL的發(fā)生。
方法:
首先采集80例B-NHL患者(其中MCL20例)骨髓或外周血標本,F(xiàn)icoll法分離單個核細胞,磁珠分選CD19陽性細胞后,采用RQ-PCR法檢測SOX11 mRNA的表達水平,同時對MCL患者進行隨訪,分析SOX11在MCL中的預后價值。接著采用逆轉(zhuǎn)錄-實時定量聚合酶鏈(RQ-PCR)和Western-Blot(WB)方法檢測6株MCL細胞系SOX1
3、1 mRNA、蛋白以及miR-223的表達水平;利用Lipofectamine 2000瞬時轉(zhuǎn)染hsa-miR-223至MCL細胞系MARVER-1細胞,分別于6h、12h、24h、48h和72h檢測SOX11mRNA和miR-223的表達水平以及SOX11蛋白表達水平,并觀察轉(zhuǎn)染后MARVER-1細胞增殖、周期和凋亡情況;最后通過構(gòu)建插入SOX113'UTR的質(zhì)粒與hsa-miR-223共同轉(zhuǎn)染293T細胞,利用雙熒光素酶報告基因檢測
4、方法檢測熒光強度,從而確定SOX11是否為miR-223的直接靶基因。
結(jié)果:
第一部分:
1)20例MCL患者中的SOX11 mRNA表達水平明顯高于其余60例B-NHL患者(3.00±0.85vs2.61±0.66,P=0.014),單獨與慢性淋巴細胞白血病(CLL,2.70±0.60)、脾邊緣區(qū)淋巴瘤(SMZL,1.60±0.43)相比表達水平也明顯升高(P值分別為0.020和0.002)
5、,但與毛細胞白血病(HCL,2.82±0.73)相比無明顯差異(P=0.369);
2)在MCL患者中白細胞升高、12號染色體三體、MYC基因擴增和近期療效<PR的患者SOX11水平明顯降低(P值分別為0.042、0.009、0.013和0.028),此外SOX11 mRNA水平與腫瘤負荷標志β2微球蛋白(β2MG)呈負相關(P=0.023,r=-0.616);
3)對20例MCL患者中位隨訪25(5~146
6、)個月,發(fā)現(xiàn)SOX11 mRNA高表達組的患者(相對表達值≥3)無進展生存(PFS)時間和總生存(OS)時間較低表達組均明顯延長(P=0.002;P=0.043)。
第二部分:
1)6株MCL細胞系中,miR-223和SOX11表達存在差異,選取miR-223表達水平最低的MARVER-1細胞作為實驗研究對象;
2)瞬時轉(zhuǎn)染hsa-miR-223至MARVER-1細胞6h到72h之間miR-22
7、3的表達水平上升了400~2500倍,但SOX11 mRNA水平未見明顯變化,但其蛋白水平在轉(zhuǎn)染后48h開始下降;
3)轉(zhuǎn)染后72h實驗組與未轉(zhuǎn)染組相比相對增殖率顯著上升(P=0.000);轉(zhuǎn)染后72h檢測細胞周期、凋亡,實驗組與未轉(zhuǎn)染組相比無明顯變化;
4)雙熒光素酶報告基因檢測方法顯示實驗組和對照組相比熒光強度無明顯變化,提示SOX11并非miR-223直接的靶基因。
結(jié)論:
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 第一部分-Sox11基因在套細胞淋巴瘤中作用機制研究;第二部分-B淋巴增殖性疾病中IGHV突變狀態(tài)研究.pdf
- MicroRNA-21在彌漫大B細胞淋巴瘤中的表達及作用機制研究.pdf
- Syk在人B淋巴瘤細胞中的表達及作用機理研究.pdf
- tuc.475在b細胞淋巴瘤中的作用機制研究
- MLL2在B細胞淋巴瘤中的表達及調(diào)控機制研究.pdf
- 魚藤素抑制套細胞淋巴瘤細胞增殖及其機制的研究.pdf
- Ad-TRAIL對T淋巴瘤細胞株殺傷作用研究套細胞淋巴瘤臨床預后分析.pdf
- 白藜蘆醇對淋巴瘤細胞作用機制的研究.pdf
- 套細胞淋巴瘤1例及相關文獻分析.pdf
- t細胞淋巴瘤和b細胞淋巴瘤的分類
- 套細胞淋巴瘤的診治ppt課件
- B淋巴細胞刺激因子及增殖誘導配體在B細胞非霍奇金淋巴瘤中表達及臨床意義的研究.pdf
- 腫瘤相關巨噬細胞與淋巴瘤細胞相互作用及雷利度胺作用機制研究.pdf
- PTEN在NK-T細胞淋巴瘤中的表達及意義.pdf
- 淋巴瘤相關巨噬細胞(CD-,68-陽性細胞)在彌漫大B細胞性淋巴瘤及濾泡性淋巴瘤間質(zhì)中的表達及其臨床意義的研究.pdf
- 地西他濱抗套細胞淋巴瘤細胞株Jeko-1作用機制的研究.pdf
- MicroRNA-223在淋巴細胞白血病原代細胞中表達及作用機制的研究.pdf
- PTEN和PCNA蛋白在胃MALT淋巴瘤中表達的相關性研究及意義.pdf
- 來那度胺在套細胞淋巴瘤治療中的價值及其機制的研究.pdf
- Ku80、PDGFR-α及PD-L1在鼻NK-T細胞淋巴瘤中表達及意義.pdf
評論
0/150
提交評論