2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、背景和目的:
   套細胞淋巴瘤(MCL)是一類少見的小B細胞非霍奇金淋巴瘤(NHL),其特征是t(11;14)(q13;q32)異常和細胞周期蛋白D1(cyclinD1)的過表達。近期研究發(fā)現(xiàn)在神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中起到重要作用的SOX11基因在MCL中高表達,且不依賴于cyclinD1的表達水平,但其預后價值尚不明確;本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)微小RNA-223(miR-223)的表達水平在MCL中明顯下調(diào)。由此我們推測SOX11可能

2、通過miR-223的調(diào)控作用而參與MCL的發(fā)生。
   方法:
   首先采集80例B-NHL患者(其中MCL20例)骨髓或外周血標本,F(xiàn)icoll法分離單個核細胞,磁珠分選CD19陽性細胞后,采用RQ-PCR法檢測SOX11 mRNA的表達水平,同時對MCL患者進行隨訪,分析SOX11在MCL中的預后價值。接著采用逆轉(zhuǎn)錄-實時定量聚合酶鏈(RQ-PCR)和Western-Blot(WB)方法檢測6株MCL細胞系SOX1

3、1 mRNA、蛋白以及miR-223的表達水平;利用Lipofectamine 2000瞬時轉(zhuǎn)染hsa-miR-223至MCL細胞系MARVER-1細胞,分別于6h、12h、24h、48h和72h檢測SOX11mRNA和miR-223的表達水平以及SOX11蛋白表達水平,并觀察轉(zhuǎn)染后MARVER-1細胞增殖、周期和凋亡情況;最后通過構(gòu)建插入SOX113'UTR的質(zhì)粒與hsa-miR-223共同轉(zhuǎn)染293T細胞,利用雙熒光素酶報告基因檢測

4、方法檢測熒光強度,從而確定SOX11是否為miR-223的直接靶基因。
   結(jié)果:
   第一部分:
   1)20例MCL患者中的SOX11 mRNA表達水平明顯高于其余60例B-NHL患者(3.00±0.85vs2.61±0.66,P=0.014),單獨與慢性淋巴細胞白血病(CLL,2.70±0.60)、脾邊緣區(qū)淋巴瘤(SMZL,1.60±0.43)相比表達水平也明顯升高(P值分別為0.020和0.002)

5、,但與毛細胞白血病(HCL,2.82±0.73)相比無明顯差異(P=0.369);
   2)在MCL患者中白細胞升高、12號染色體三體、MYC基因擴增和近期療效<PR的患者SOX11水平明顯降低(P值分別為0.042、0.009、0.013和0.028),此外SOX11 mRNA水平與腫瘤負荷標志β2微球蛋白(β2MG)呈負相關(P=0.023,r=-0.616);
   3)對20例MCL患者中位隨訪25(5~146

6、)個月,發(fā)現(xiàn)SOX11 mRNA高表達組的患者(相對表達值≥3)無進展生存(PFS)時間和總生存(OS)時間較低表達組均明顯延長(P=0.002;P=0.043)。
   第二部分:
   1)6株MCL細胞系中,miR-223和SOX11表達存在差異,選取miR-223表達水平最低的MARVER-1細胞作為實驗研究對象;
   2)瞬時轉(zhuǎn)染hsa-miR-223至MARVER-1細胞6h到72h之間miR-22

7、3的表達水平上升了400~2500倍,但SOX11 mRNA水平未見明顯變化,但其蛋白水平在轉(zhuǎn)染后48h開始下降;
   3)轉(zhuǎn)染后72h實驗組與未轉(zhuǎn)染組相比相對增殖率顯著上升(P=0.000);轉(zhuǎn)染后72h檢測細胞周期、凋亡,實驗組與未轉(zhuǎn)染組相比無明顯變化;
   4)雙熒光素酶報告基因檢測方法顯示實驗組和對照組相比熒光強度無明顯變化,提示SOX11并非miR-223直接的靶基因。
   結(jié)論:
  

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