抗腦抗體對腦免疫攻擊作用的利弊研究.pdf

1、目的:通過新西蘭大白兔腦皮層注射抗腦抗體,研究其對腦組織的免疫攻擊作用；觀察抗腦抗體對體外C6腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、凋亡和侵襲力的影響；探討免疫抑制治療在繼發(fā)性顱腦創(chuàng)傷影像學、病理學和腦脊液檢測三方面的具體表現(xiàn)及作用機制。
　　 方法:實驗共分三部分,第一部分,24只新西蘭大白兔隨機分為3組,即抗腦抗體組、免疫抑制組(免疫抑制組隔日口服環(huán)孢素軟膠囊50mg/只)和生理鹽水對照組,前兩組新西蘭大白兔大腦皮層微量注射抗腦抗體,對照組于

2、相同部位注射等量生理鹽水,一個月后處死新西蘭大白兔,取注射點周圍皮層組織,用免疫組織化學方法,測定其谷氨酸表達,用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標記法測定其細胞凋亡情況；第二部分,將C6細胞分為實驗組和對照組,實驗組加入不同濃度的抗腦抗體,對照組不加抗腦抗體；分別采用MTT法、流式細胞術(shù)及Boyden小室測算C6增殖抑制率、細胞凋亡率及穿膜細胞數(shù)；第三部分,將24只新西蘭大白兔隨機分為3組,即假手術(shù)組、創(chuàng)傷組、免疫抑制組(術(shù)前1

3、h、術(shù)后1d、2d、3d經(jīng)耳緣靜脈注射環(huán)孢素A10mg/kg),假手術(shù)組只開骨窗不打擊,后兩組建立兔腦單側(cè)重型液壓沖擊創(chuàng)傷模型。3組大白兔分別于術(shù)前1h、術(shù)后1d、3d、7d、14d小腦延髓池抽取腦脊液,通過ELISA方法檢測抗腦抗體濃度；術(shù)后8h、3d、7d、14d行腦部核磁共振檢查；術(shù)后15d將三組大白兔全部處死,取術(shù)側(cè)腦組織,行病理學檢查。
　　 結(jié)果:第一部分,抗腦抗體組大白兔腦皮層注射抗腦抗體1個月后,其谷氨酸表達以及

4、凋亡均明顯高于對照組和免疫抑制組,三組比較有顯著性差異(P<0.05)；第二部分,抗腦抗體對體外培養(yǎng)的C6膠質(zhì)瘤細胞增殖抑制、誘導(dǎo)凋亡及抑制侵襲作用隨濃度的增加而增強,呈明顯量效關(guān)系(P<0.05)；第三部分,MRI顯示相同時間點免疫抑制劑組腦水腫體積較創(chuàng)傷組明顯縮小且病程時間明顯縮短；病理腦切片顯示免疫抑制劑組炎性細胞數(shù)量較創(chuàng)傷組顯著減少,較假手術(shù)組多；創(chuàng)傷組腦脊液的抗腦抗體濃度較免疫抑制組、假手術(shù)組相同時間點明顯增高。三組新西蘭大白

5、兔在影像學、病理學和腦脊液檢測三方面的結(jié)果比較有顯著差異(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.抗腦抗體通過自身免疫攻擊導(dǎo)致神經(jīng)細胞凋亡和谷氨酸表達增高,引起腦組織損傷；2.抗腦抗體可抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的增殖、侵襲作用,并誘導(dǎo)其凋亡；3.抗腦抗體對具有神經(jīng)組織特性的細胞具有攻擊作用,具備攻擊腦腫瘤細胞的有利作用,同時也具有攻擊正常腦細胞的有害作用,是一把“雙刃劍”；4.顱腦創(chuàng)傷致腦脊液抗腦抗體明顯升高,顱腦創(chuàng)傷可能具有自身免疫性疾病的