MTBE對(duì)小鼠腦組織的毒作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：探討甲基叔丁基醚(MTBE)對(duì)孕鼠及其胎鼠腦組織的毒作用及分子機(jī)制。 方法：選用健康成年昆明種孕鼠40只隨機(jī)分為空白對(duì)照組和MTBE四個(gè)實(shí)驗(yàn)組，每組8只孕鼠。以檢出陰栓當(dāng)天為孕0天，從懷孕第0天開始，給孕鼠以不同劑量的MTBE經(jīng)口灌胃染毒，實(shí)驗(yàn)組MTBE染毒劑量為25, 100, 400, 800mg/kg.bw，每天一次，直到胎鼠出生。觀察胎鼠一般生長發(fā)育情況，然后斷頭處死，取出腦組織備用。應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法觀察胎鼠大

2、腦皮質(zhì)、海馬和小腦皮質(zhì)nNOS及神經(jīng)遞質(zhì)Glu的分布和變化；分光光度法檢測胎鼠腦組織中Na+，K+-ATP酶、Ca2+，Mg2+-ATP酶、SOD、GSH活性及LDH、MDA含量的改變；HE染色和Nissl染色觀察MTBE對(duì)孕鼠和胎鼠大腦皮質(zhì)、海馬和小腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)改變；透射電鏡下觀察孕鼠和胎鼠小腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果: 1、妊娠期母鼠接觸MTBE濃度為400、800mg/kg.bw時(shí)，胎鼠大腦皮層

3、、小腦皮層和海馬nNOS和神經(jīng)遞質(zhì)Glu的表達(dá)隨著染毒劑量增加而減少。其中以大腦皮質(zhì)改變最為明顯。 2、妊娠期母鼠接觸高劑量MTBE對(duì)胎鼠腦組織ATP酶活性可產(chǎn)生明顯的抑制作用，當(dāng)MTBE染毒劑量增加到400、800mg/kg.bw時(shí)，胎鼠腦組織中Na＋, K＋-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase活性明顯降低，與對(duì)照組比較差異有顯著性。 3、隨著妊娠期母鼠接觸MTBE劑量的增加，胎鼠腦組織中LD

4、H含量呈現(xiàn)逐漸升高的趨勢，與對(duì)照組比較差異有顯著性。 4、妊娠期母鼠接觸不同劑量的MTBE后，胎鼠腦組織中MDA、SOD、GSH測定結(jié)果表明：隨著孕鼠MTBE染毒劑量的增加，胎鼠腦組織中MDA含量升高，GSH含量及SOD活性逐漸降低，100、400mg/kg.bw MTBE組與對(duì)照組比較差異有顯著性，呈現(xiàn)一定的劑量－效應(yīng)關(guān)系。 5、孕鼠接觸MTBE，孕鼠和胎鼠腦組織切片HE染色和Nissl染色光鏡下其大腦皮質(zhì)、小腦皮質(zhì)和

5、海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)未見明顯改變。但通過8000倍透射電鏡觀察，可見孕鼠和胎鼠小腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)出現(xiàn)損傷作用，表現(xiàn)為神經(jīng)細(xì)胞膜皺縮，神經(jīng)細(xì)胞水腫變性，膠質(zhì)細(xì)胞增生，胞漿內(nèi)線粒體結(jié)構(gòu)模糊或腫脹、嵴丟失呈空泡樣變，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張等。 結(jié)論: 1、妊娠期母鼠接觸MTBE可對(duì)胎鼠及母鼠自身腦組織產(chǎn)生一定的損傷作用。 2、MTBE可透過胎盤屏障和血腦屏障，通過氧化損傷機(jī)制，損傷胎鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)，降低其ATP酶