PCBP2在病毒誘導肝細胞產(chǎn)生I型干擾素中的作用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、PCBP2是核不均一核糖核蛋白(hnRNP)家族成員之一,能特異性結(jié)合富含胞嘧啶RNA片段,在細胞生理過程中發(fā)揮著重要的作用,例如參與轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控、與microRNA、蛋白相互作用。PCBP2也是宿主細胞分泌的細胞因子之一,近些年研究PCBP2與病毒之間的相互關(guān)系的報道越來越多,發(fā)現(xiàn)PCBP2能參與多種病毒RNA的復制過程,還能調(diào)控細胞的免疫應答反應。PCBP2影響丙型肝炎病毒(HCV)、新城疫病毒(NDV)病毒RNA的復制已有報道,但

2、是PCBP2在病毒誘導肝細胞產(chǎn)生Ⅰ型干擾素中的具體作用卻未見報道。
   本文主要探討了PCBP2在病毒誘導肝細胞產(chǎn)生Ⅰ型干擾素中的作用,首先我們設計了沉默PCBP2基因的shRNA,將其插入到新型載體pSilencer后轉(zhuǎn)染到肝細胞HLCZ01中,成功建立了對PCBP2基因沉默效果在60%-90%左右的穩(wěn)定細胞系。以此為基礎,我們使用了體外合成的的雙鏈RNA試劑poly(I∶C)刺激細胞,結(jié)果發(fā)現(xiàn)沉默PCBP2,細胞內(nèi)IFNβ

3、的表達量上調(diào);使用單股負鏈RNA病毒NDV感染細胞,發(fā)現(xiàn)沉默PCBP2,細胞內(nèi)NDV水平下調(diào),但是IFNβ以及其下游四種干擾素刺激基因ISG12a、ISG56、ISG60以及G1P3的表達量明顯上調(diào);最后采用單股正鏈RNA病毒HCV感染細胞,發(fā)現(xiàn)沉默PCBP2可抑制HCV的復制水平,同時促進IFNβ以及ISG12a、ISG56、ISG60以及G1P3的表達水平。由此可見,沉默PCBP2,細胞內(nèi)病毒量下調(diào),IFNβ表達水平上調(diào),PCBP2

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