骨巨細(xì)胞瘤生物學(xué)行為評(píng)估及Notch受體在其發(fā)病機(jī)制中的作用研究.pdf

1、第一部分：術(shù)前MRI在預(yù)測骨巨細(xì)胞瘤復(fù)發(fā)的價(jià)值研究
　　目的:評(píng)估骨巨細(xì)胞瘤(GiantCellTumorofBone，GCTb)術(shù)后局部復(fù)發(fā)與臨床基本資料、MR征象和手術(shù)方式的關(guān)系，探討能預(yù)測腫瘤復(fù)發(fā)的MR征象。
　　材料與方法:回顧性分析我院1997年3月至2012年11月在我院行手術(shù)治療并經(jīng)病理證實(shí)為GCTb患者109例。由兩位有經(jīng)驗(yàn)的從事肌骨研究的放射科醫(yī)師分析以下MR征象:是否為偏心性、腫瘤的最大徑、T1WI信號(hào)特

2、點(diǎn)、T2WI信號(hào)特點(diǎn)、STIR信號(hào)特點(diǎn)、病灶內(nèi)有無出血、有無囊變壞死、有無液-液平、“卵石征”、是否合并病理性骨折、是否有骨質(zhì)膨脹改變、骨皮質(zhì)破壞中斷情況、有無軟組織腫塊形成、病灶與周圍組織的分界是否清晰、病灶周圍的有無水腫、鄰近的關(guān)節(jié)受累情況和鄰近關(guān)節(jié)有無積液。本研究僅包括接受瘤段切除和病灶內(nèi)刮除的手術(shù)患者。用單因素分析和Cox比例風(fēng)險(xiǎn)分析來評(píng)估臨床基本情況、MRI征象和手術(shù)方式對(duì)腫瘤復(fù)發(fā)的影響。
　　結(jié)果:109例患者中，男性

3、50例(43％)，女性59例(57％)，平均年齡33.9歲（范圍:14～69歲）。術(shù)后平均隨訪時(shí)間42個(gè)月。71例(65％)患者接受了病灶內(nèi)刮除手術(shù)，38例(35％)患者接受了瘤段切除手術(shù)。86例(79％)患者無術(shù)后腫瘤復(fù)發(fā)。23例(21％)患者有腫瘤局部復(fù)發(fā)，其中21例為病灶內(nèi)刮除術(shù)后患者，2例為瘤段切除術(shù)后患者。術(shù)后平均復(fù)發(fā)時(shí)間為26.7個(gè)月（范圍:3～111個(gè)月）。3例為股骨遠(yuǎn)端局部復(fù)發(fā)，6例為脛骨近端，7例為脊柱，2例為橈骨遠(yuǎn)端

4、，5例為其他部位。GCTb復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)因素中，病灶位于脊柱，MRI征象中的骨皮質(zhì)破壞中斷、軟組織腫塊形成和病灶邊界不清晰，手術(shù)方式中的單純刮除和病灶刮除+植骨+石炭酸與腫瘤局部復(fù)發(fā)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　結(jié)論:MRI可以作為預(yù)測GCTb局部復(fù)發(fā)的有效影像學(xué)檢查手段。骨皮質(zhì)中斷破壞、軟組織腫塊形成和病灶邊界不清晰是腫瘤復(fù)發(fā)的高危因素。與瘤段切除相比，患者接受病灶內(nèi)刮除的局部復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)明顯增高。但選擇手術(shù)方式需要在最大限度的保

5、留關(guān)節(jié)功能和腫瘤復(fù)發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)之間取得平衡。
　　第二部分：CD34、Ki-67和p53在骨巨細(xì)胞瘤中的表達(dá)及生物學(xué)意義研究
　　目的:探討GCTb中CD34、Ki-67、p53的表達(dá)與腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系，為GCTb生物學(xué)行為和預(yù)后判斷提供理論依據(jù)。
　　材料與方法:運(yùn)用免疫組織化學(xué)EnVision法檢測73例GCTb中CD34、Ki-67、p53的表達(dá)，分析其與臨床基本特征、X線分級(jí)、MRI分級(jí)和腫瘤復(fù)發(fā)的關(guān)系。
　　

6、結(jié)果:(1)GCTb中，CD34標(biāo)記的平均微血管密度(MicrovesselDensity，MVD)位于中軸骨者顯著高于四肢骨骼者（P＜0.01）。不同MRI分級(jí)之間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。有復(fù)發(fā)組高于無復(fù)發(fā)組（P＜0.05）。腫瘤組織的MVD值在患者的不同性別、年齡和X線分級(jí)之間均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均大于0.05）。(2)GCTb中Ki-67表達(dá)陽性者62例，其中弱陽性27例，中等陽性30例，強(qiáng)陽性5例，陰性者11例，陽性

7、率為84.9％(62/73)。p53表達(dá)陽性者57例，其中弱陽性24例，中等陽性26例，強(qiáng)陽性7例，陰性者16例，陽性率為78.1％(57/73)。Ki-67、p53的表達(dá)與患者的性別、年齡、部位、X線分級(jí)、MR1分級(jí)及復(fù)發(fā)情況均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值均大于0.05）。Ki-67、p53不同表達(dá)程度之間的MVD差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P值分別小于0.01和0.05）。(3)GCTb中MRI分級(jí)、MVD、Ki-67、p53的表達(dá)相互之間均具有相關(guān)性

8、（P值均小于0.01）。而X線分級(jí)與MRI分級(jí)、MVD、Ki-67、p53的表達(dá)均無相關(guān)性（P值均大于0.05）。
　　結(jié)論:MVD值與GCTb的復(fù)發(fā)有關(guān)，可作為腫瘤預(yù)后的判斷指標(biāo)。Ki-67、p53的表達(dá)與MVD具有相關(guān)性，可能參與腫瘤細(xì)胞增殖、微血管增生的過程，但與腫瘤的復(fù)發(fā)無關(guān)。
　　第三部分：Notch受體在骨巨細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)制中作用的初步研究
　　目的:Notch受體已被證明對(duì)許多惡性腫瘤有影響，但Notch受

9、體在GCTb中的作用仍不清楚。本研究通過在核糖核酸和蛋白水平檢測人類GCTb中Notch受體的表達(dá)來探討這一問題。
　　材料與方法:運(yùn)用RT-PCR和Westernblot技術(shù)檢測36例新鮮GCTb(22例原發(fā)組和14例復(fù)發(fā)組)和7例松質(zhì)骨（對(duì)照組）樣本中Notch1～4的mRNA和蛋白表達(dá)情況。
　　結(jié)果:通過RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，GCTb組織中所有4種Notch受體mRNA呈不同程度表達(dá)。與松質(zhì)骨組織相比，在原發(fā)和復(fù)發(fā)G

10、CTb組織中Notch1mRNA的表達(dá)水平明顯減低（P＜0.05），Notch2表達(dá)上調(diào)（P＜0.05）。而在原發(fā)和復(fù)發(fā)GCTb中，Notch1mRNA和Notch2mRNA的表達(dá)無差異（P＞0.05）。Notch3mRNA和Notch4mRNA在原發(fā)GCTb，復(fù)發(fā)GCTb和松質(zhì)骨組織中的表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。Westernblot分析表明在蛋白質(zhì)水平上得到一致的結(jié)果。
　　結(jié)論:Notch受體表達(dá)失控和Not