84K楊UPB1-Like基因的克隆及遺傳轉化.pdf

1、學校代碼：10225學號：S14785學位論文84K楊UPB1一Like基因的克隆及遺傳轉化指導教師姓名：申請學位級別：論文提交日期：授予學位單位：董洋王柏臣研究員中科院植物研究所碩士2014年6月東北林業(yè)大學學科專業(yè)：論文答辯日期：授予學位日期：答辯委員會主席：論文評閱人：聾方厶櫛素大學林木遺傳育種2014年6月13日2014年6月摘要摘要UPBEATI(UPBl)是一種調節(jié)擬南芥根部細胞分生分化平衡的轉錄因子，它直接作用于一系列過氧

2、化物酶進而來調節(jié)細胞伸長區(qū)和分化區(qū)之間活性氧的表達。研究表明，當UPBI的活性遭到破壞時，活性氧的平衡受到影響，從而導致分化的延遲。值得注意的是UPBl調控活性氧平衡的途徑是獨立于植物生長素和細胞分裂素信號途徑的。本研究利用生物信息學的方法在楊樹數(shù)據(jù)庫中查找到擬南芥UPBl的同源基因UPBl一Likel與UPBlLike2，并克隆這兩個基因，獲得了417bp的UPBlLikelCDS序列和408bp的UPBl一Like2CDS序列。半定

3、量PCR結果顯示，UPBILike基因在楊樹幼莖和根部表達量較高，表明該基因可能在楊樹的根部和莖部具有重要的生物學功能。瞬時表達結果顯示楊樹UPBlLike基因定位于細胞核及細胞膜上。為深入探討其生物學功能，本研究利用Gatewaycloningsystem成功構建了楊樹UPBl一Like的過表達(35S：UPBl一Like—GFP)及抑制表達(RNAi—Likel2pGWB2)載體，并將其在楊樹及擬南芥植株中進行了過表達和抑制表達，共

4、獲得20個突變株系。與野生型相比，過表達UPBlLike基因的楊樹突變株系中均表現(xiàn)出莖短而細、節(jié)間距短、根短且根毛豐富等生物性狀；而抑制表達UPBlLike基因的楊樹莖長而粗，節(jié)間距較長。這些結果表明，UPBlLike對楊樹根部和莖部的生長發(fā)育具有重要的調控作用。尤其對于其生長量的累積調控具有重要作用。因此，本項研究對于培育速生優(yōu)質的林木新品種具有重要的生產(chǎn)實踐意義。同時對于揭示楊樹細胞分化和生長平衡的調節(jié)機制也具有重要的意義。關鍵詞8