先天性心臟病介入治療并發(fā)癥防治的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、本研究分為二部分： 第一部分 生物活性分子共價(jià)包被ASD堵閉器材料的體外生物相容性研究 目的：體外評(píng)價(jià)殼聚糖、殼聚糖/纖維連接素、殼聚糖/肝素、殼聚糖/重組水蛭素等共價(jià)包被ASD堵閉器材料鎳鈦合金片的生物相容性。 方法：2005年11月～2006年10月，在南京醫(yī)科大學(xué)心血管藥理研究室，通過(guò)體外試驗(yàn)，檢測(cè)不同包被組別鎳鈦合金片的生物相容性。試驗(yàn)分為血液相容性試驗(yàn)和細(xì)胞相容性試驗(yàn)兩部分。 1．血液相容性試驗(yàn)

2、： (1)實(shí)驗(yàn)分組：共分6組，分別為空白血液對(duì)照組(Contral)、未包被組(Uncoating)、殼聚糖包被組(chitosan，Chi)、殼聚糖/纖維連接素包被組(chitosan/fibronectin，Chi/Fn)、殼聚糖/肝素包被組(chitosan/heparin，Chi/Hep)、殼聚糖/重組水蛭素包被組(chitosan/r-himdin，Chi-Hir)，后三組又按Fn、Hep、r-Hir包被的不同濃度分成

3、低、中、高三個(gè)劑量組。 (2)試驗(yàn)方法：將3種生物活性分子共價(jià)交聯(lián)于鎳鈦金屬表面，通過(guò)血液溶血試驗(yàn)和動(dòng)態(tài)全人血接觸試驗(yàn)，計(jì)算溶血率和進(jìn)行血細(xì)胞記數(shù)檢測(cè)，觀察不同實(shí)驗(yàn)組鎳鈦合金片對(duì)血細(xì)胞的毒性反應(yīng)；通過(guò)檢測(cè)接觸后各血液樣本部分凝血活酶活化時(shí)間(APTT)、凝血酶原時(shí)間(PT)、凝血酶時(shí)間(TT)及纖維蛋白原(FIB)和D-二聚體(DD)濃度，觀察鎳鈦合金片接觸后血液凝血、抗凝、和纖溶反應(yīng)的變化；通過(guò)掃描電子顯微鏡，觀察血液接觸后不

4、同實(shí)驗(yàn)組鎳鈦合金片表面血小板吸附、聚集和纖維蛋白的沉積。 2．細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)：將體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HuVECs)種植于不同包被組別鎳鈦合金片表面，在37℃、5％C02細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育72h，分別應(yīng)用Fn、Ki67免疫熒光抗體標(biāo)記，觀察HuVECs在不同包被組別鎳鈦合金片表面的黏附、生長(zhǎng)和增殖情況，半定量分析HuVECs在鎳鈦合金片表面的黏附和增殖。 結(jié)果： 1．血液相容性實(shí)驗(yàn)：(1)不同包被組別鎳鈦合金片

5、溶血率在1.6～1.7％之間(均小于5％)；(2)接觸后血液紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板計(jì)數(shù)均在正常范圍內(nèi)且各組間未見(jiàn)明顯差異；(3)與Contral組相比，Uncoating組、Chi組、及Chi/Fn組對(duì)APTT、PT和TT無(wú)影響；Chi/Hep組和Chi/r-Hir組與Contral組、Uncoating組、Chi組、及Chi／Fn組相比APTT、PT和TT均延長(zhǎng)；與Chi/Hep組相比，Chi/r-Hir組明顯延長(zhǎng)APTT和TT，但P

6、T兩組無(wú)差異。 (各組方差均齊，LSD及SNK檢驗(yàn)結(jié)果相同，P

7、板黏附和纖維蛋白沉積。 2．細(xì)胞相容性實(shí)驗(yàn)：(1)經(jīng)過(guò)與HUVECs 72h的共同孵育，鎳鈦合金片邊緣細(xì)胞生長(zhǎng)、移行良好，未見(jiàn)細(xì)胞變形;(2)應(yīng)用反映細(xì)胞黏附的Fn免疫熒光抗體標(biāo)記HUMECs，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞在不同組別鎳鈦合金片表面黏附順序如下：Chi/Fn組>Chi組>Uncoating組>Chi/r-Hir組>Chi/Hep組，不同濃度生物活性分子包被的鎳鈦合金片表面HuVECs的黏附未見(jiàn)差異；(3)應(yīng)用反映細(xì)胞增殖的Ki

8、67免疫熒光抗體標(biāo)記HuMECs，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞在鎳鈦金屬表面增殖順序如下：Chi/Fn 組>Chi組=Uncoating組>Chi/r-Hir組>Chi/Hep組，不同濃度生物活性分子包被的鎳鈦合金片表面細(xì)胞的增殖未見(jiàn)明顯差異，但Chi/Hep組明顯抑制HUMECs的增殖活性。 結(jié)論：殼聚糖/纖維連接素包被鎳鈦合金片后，對(duì)血液的凝血、抗凝和纖溶反應(yīng)無(wú)明顯影響，但明顯促進(jìn)HuVECs在其表面的黏附和增殖，從而促進(jìn)HUVECs

9、在其表面的生長(zhǎng)；殼聚糖/肝素和殼聚糖/重組水蛭素包被鎳鈦合金片后均表現(xiàn)出良好抗凝活性；殼聚糖/肝素對(duì)HUVECs的生長(zhǎng)有一定的抑制作用，殼聚糖/重組水蛭素包被與殼聚糖/肝素包被相比，稍有利于HuVECs在鎳鈦合金片表面的黏附和增殖。 第二部分 PMVSD介入封堵術(shù)后早期心律失常的發(fā)生、處理和相關(guān)影響因素分析 目的：觀察應(yīng)用對(duì)稱性膜部室間隔缺損堵閉器(sMVSDO)介入封堵膜周部室間隔缺損(PMVSD)患者術(shù)后早期，心律失

10、常的發(fā)生、處理和相關(guān)影響因素的分析。 方法： 2003年12月至2006年9月，南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院心臟科，應(yīng)用sMVSDO對(duì)124例PMVSD患者成功進(jìn)行介入封堵手術(shù)。(1)利用心電圖、動(dòng)態(tài)心電圖和心電監(jiān)護(hù)，記錄患者術(shù)前和術(shù)后的平均心率(mHR)、PR間期、QRs波寬度和QTc值等基本心電參數(shù)；同時(shí)記錄術(shù)前和術(shù)后出現(xiàn)的各種類型的心律失常；(2)利用超聲心動(dòng)圖記錄PMVSD位置、形狀和大小；測(cè)量缺損口上端與主動(dòng)脈右冠狀竇瓣環(huán)

11、的距離和下端與三尖瓣隔瓣的距離；(3)右心導(dǎo)管檢查測(cè)量右心室收縮壓和主肺動(dòng)脈收縮壓；左心室造影觀察PMVSD的形狀、測(cè)量缺損口的大小、測(cè)量缺損口上端與主動(dòng)脈右冠狀竇瓣環(huán)的距離，同時(shí)選擇合適大小的堵閉器完成介入封堵手術(shù)；(4)分析PM：VSD介入封堵術(shù)后新發(fā)心律失常的影響因素。 結(jié)果：(1)PMVSD患者介入術(shù)后mHR和QRS波寬度大于術(shù)前(P<0.05)，PR間期和QTc值術(shù)前和術(shù)后無(wú)明顯變化：(2)應(yīng)用sMVSDO介入封堵12

12、4例PMVSD術(shù)后1～10天，55例(44.4％)患者新發(fā)各種類型的心律失常，包括完全性和不完全性右束支傳導(dǎo)阻滯21例(16.9％)、非陣發(fā)性交界性心動(dòng)過(guò)速15例(12.1％)、室性期前收縮11例(8.9％)、非陣發(fā)性室性心動(dòng)過(guò)速11例(8.9％)、房室傳導(dǎo)阻滯9例(7.3％)、完全性和不完全性左束支傳導(dǎo)阻滯7例(5.6％)以及房性期前收縮3例(2.4％)；(3)除高度或Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯必須應(yīng)用糖皮質(zhì)激素和臨時(shí)起搏治療外，其它類型的心律

13、失常無(wú)須藥物治療，但必須加強(qiáng)床邊心電監(jiān)護(hù)，延長(zhǎng)住院觀察時(shí)間，防止意外情況的發(fā)生；(4)介入術(shù)后心律失常發(fā)生與下列三個(gè)因素有關(guān)：a膜部瘤型PMVSD：缺損口上端與主動(dòng)脈右冠狀竇瓣環(huán)的距離大于3.0mm或缺損下端與三尖瓣隔瓣的距離小于1.9mm；b無(wú)膜部瘤形PMVSD缺損口上端與主動(dòng)脈右冠狀竇瓣環(huán)的距離大于4.2mm或缺損下端與三尖瓣隔瓣的距離小于2.1mm；無(wú)膜部瘤形PMVSD缺損口直徑大于4.2mm或堵閉器直徑大于7.1mm。(5)PM

14、VSD介入術(shù)后早期心律失常發(fā)生與缺損口下端與三尖瓣隔瓣的距離大小有關(guān)；而缺損口上端與主動(dòng)脈右冠狀竇瓣環(huán)的距離只與術(shù)后發(fā)生完全性和不完全性右束支傳導(dǎo)阻滯和非陣發(fā)性交界性心動(dòng)過(guò)速有關(guān)。 結(jié)論：應(yīng)用sMVSDO介入封堵PMVSD術(shù)后1～10天，約45％左右的患者會(huì)出現(xiàn)各種類型的心律失常。除高度和Ⅲ度房室傳導(dǎo)阻滯需糖皮質(zhì)激素和臨時(shí)起搏器治療外，適當(dāng)延長(zhǎng)心電監(jiān)護(hù)和住院觀察時(shí)間，心律失常可自行痊愈。缺損口下端與三尖瓣隔瓣的距離大小與PMVS