多西環(huán)素對鼠退變椎間盤中金屬蛋白酶抑制作用的實驗研究.pdf

1、椎間盤的退行變已經(jīng)是直接或間接引起腰背部疼痛的病因，而且其患病率很高，嚴(yán)重影響中年人群生活質(zhì)量?，F(xiàn)在大多數(shù)學(xué)者認為，椎間盤退變的主要由間盤所在的生物力學(xué)和生物學(xué)環(huán)境共同作用的結(jié)果。很多學(xué)者都在研究通過促進間盤基質(zhì)合成和／或抑制降解酶活性的分子阻止間盤退變或使間盤細胞再生來治療腰椎間盤退變引起的慢性腰痛疾病。多西環(huán)素是四環(huán)素類抗生素，可以抑制間盤退變中的關(guān)鍵酶MMPs的mRNA表達及通過與酶活性位點結(jié)合直接抑制MMPs的活性，它已被廣泛用

2、于腹主動脈瘤、缺血再灌注損傷、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等疾病預(yù)防治療的實驗研究中，但還未見它應(yīng)用到間盤退變中報道。我們實驗?zāi)康氖窃谕俗冮g盤中使用多西環(huán)素，觀察它是否可以抑制MMP-3和MMP-13的表達，繼而阻止間盤的退變。 方法: 1、動物的來源純種成年SD大鼠60只，雌雄不限，由中國醫(yī)科大學(xué)動物部提供并飼養(yǎng)。 2、退變模型的建立辨別大鼠第10尾椎間盤，在相鄰的兩尾椎上穿入交叉的克氏針，并在上下椎體對應(yīng)的克氏針上綁上彈力帶

3、，使其均勻加壓并使其壓強達到1.3MPa，固定后可以自由活動，7天后間盤退變解除固定，分別在固定間盤中注入多西環(huán)素和生理鹽水，術(shù)后1周和2周分別取材。 3、HE染色和Western blot檢測采用HE染色觀察術(shù)后1周間盤退變的情況。 采用Western blot檢測術(shù)后2周退變間盤中MMP-3和MMP-13表達量。 結(jié)果: 1、HE染色結(jié)果術(shù)后第7天，髓核細胞和胞外基質(zhì)明顯減少，有部分髓核細胞出現(xiàn)調(diào)亡現(xiàn)

4、象，纖維環(huán)斷裂，終板軟骨陷凹增大。 2、Western blot檢測結(jié)果術(shù)后第14天，注入生理鹽水組MMP-3，MMP-13表達量明顯高于注入多西環(huán)素組MMP-3，MMP-13的表達，他們之間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。 討論: 1、退變動物模型的建立HE染色證實我們采用的方法使鼠尾椎動物模型已經(jīng)達到其間盤退變的目的，為研究間盤退變疾病的治療提供了良好基礎(chǔ)。 2、Western blot檢測結(jié)果的分析我