低血壓腦死亡大動物模型的建立及其供肝損傷機制研究.pdf

1、目的:腦死亡供體已為當(dāng)前器官移植領(lǐng)域重要供體來源，國外大部分供體均來自腦死亡，國內(nèi)由于受傳統(tǒng)觀念及整體醫(yī)療水平限制，腦死亡供體較少而且多屬于血流動力學(xué)不穩(wěn)定，存在一定時間低血壓的不可控型。就腦死亡供體本身而言，會導(dǎo)致機體產(chǎn)生系列病理生理學(xué)的變化，從而損害供體器官質(zhì)量，尤其是循環(huán)不穩(wěn)定、存在較長時間低血壓的供體，其機制較復(fù)雜，尚未完全闡明。為明確低血壓對腦死亡供體肝臟的損害程度及其機制，本研究擬建立低血壓腦死亡供肝大動物模型，從全身及供肝

2、局部血流動力學(xué)變化、肝功能變化、肝組織病理改變及炎癥因子變化進(jìn)行深入研究。
　　方法:選用16只巴馬小型豬，采用改良的緩慢勻速顱內(nèi)水囊加壓法建立豬腦死亡模型，取顱骨中線處鉆孔，于硬膜外置入Foley水囊注水加壓，通過升高顱內(nèi)壓使腦組織缺血缺氧從而進(jìn)行誘導(dǎo)腦死亡，并間隔12h進(jìn)行腦死亡確認(rèn)。本研究通過密切監(jiān)測腦死亡維護(hù)期間的整體血流動力學(xué)變化，肝動脈及門靜脈血流量變化，并通過血液生化學(xué)指標(biāo)，肝臟病理及電鏡，供肝標(biāo)本分子生物學(xué)檢測等方

3、法明確腦死亡狀態(tài)下低血壓對供肝質(zhì)量的影響，并探討其內(nèi)在損傷機制。
　　結(jié)果:①16只豬中14頭成功建立腦死亡模型，給予呼吸及循環(huán)支持后，8只成功維持12h;②隨著腦死亡時間延長，實驗動物心率逐漸升高，并出現(xiàn)較大幅度的波動;平均動脈壓(MAP)逐漸降低，門靜脈及肝動脈血流逐漸下降，膽汁量及尿量逐漸減少，各時間點間有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);⑨血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(AST)及乳酸脫氫酶(LDH)出現(xiàn)逐漸升高，各時間點間有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0

4、.05);④肝組織HE染色提示:腦死亡3小時(h)以內(nèi)肝結(jié)構(gòu)基本正常，可逆性改變，3h以后肝細(xì)胞水腫逐漸加重，擠壓肝竇導(dǎo)致微循環(huán)障礙，肝細(xì)胞進(jìn)一步缺氧，微泡性變性加重;隨時間延長5h以后大泡性脂肪變性提示慢性缺血性損傷，7h以后肝細(xì)胞出現(xiàn)凋亡，并出現(xiàn)氣球樣變性，提示肝細(xì)胞不可逆性損傷。⑤腦死亡后隨著時間延長，腸源性內(nèi)毒素釋放明顯增加;⑥與開腹后相比，腦死亡后3h、腦死亡后6h及腦死亡后12h，肝組織腫瘤壞死因子-a(TNF-a)、白細(xì)胞

5、介素-1β(IL-1β)、P-選擇素(P-Selectin)及內(nèi)皮素-1(ET-1)水平逐漸升高，各時間點具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)及一氧化氮(NO)水平逐漸下降，各時間點具有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05);干擾素-γ（IFN-γ）表達(dá)于3h升高，其后逐漸下降，肝組織三磷酸腺苷(ATP)含量變化呈現(xiàn)波動趨勢。
　　結(jié)論:①改良的緩慢勻速顱內(nèi)水囊加壓法可以成功地建立低血壓豬腦死亡模型;②血流動力學(xué)