陽(yáng)明腑實(shí)證大鼠模型的制備及其病理機(jī)制研究.pdf

1、《傷寒論》是中醫(yī)學(xué)的經(jīng)典論著，其對(duì)臨床辨證用藥具有重大的指導(dǎo)作用。陽(yáng)明腑實(shí)證是許多外感熱病病程中所出現(xiàn)的邪熱內(nèi)熾、又伴有腹部實(shí)證癥狀的一組全身性綜合證候。它以痞、滿、躁、實(shí)、堅(jiān)為主癥，可以出現(xiàn)在許多疾病過(guò)程中，例如：嚴(yán)重腹內(nèi)感染、重型急腹癥、嚴(yán)重創(chuàng)傷、大面積燒傷、大手術(shù)后等。具有發(fā)病急、病情重、變化快、并發(fā)癥多的特點(diǎn)，如不及時(shí)診治?？梢鹦菘?、DIC、ARDS甚至多器官功能衰竭（MODS）從而危及生命。但其辨證缺乏客觀性，療效缺乏客觀評(píng)

2、價(jià)指標(biāo)，因此，在進(jìn)行文獻(xiàn)整理與臨床驗(yàn)證等研究的同時(shí)，吸收現(xiàn)代科學(xué)知識(shí)的方法，加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)研究是十分必要的。在醫(yī)學(xué)研究中，建立疾病的動(dòng)物模型是一個(gè)重要的手段。在陽(yáng)明腑實(shí)證的研究中，復(fù)制動(dòng)物模型的方法也是必不可少的。特別是近年來(lái)，建立大鼠陽(yáng)明腑實(shí)證動(dòng)物模型是當(dāng)務(wù)之急。有了合適的動(dòng)物模型，才能建立進(jìn)一步進(jìn)行中西醫(yī)結(jié)合診治的平臺(tái)。 目的：采用灌服熱性中藥與自身糞便相結(jié)合的方法制備大鼠陽(yáng)明腑實(shí)證模型，并與已得到廣泛認(rèn)可的兩種模型（盲腸結(jié)扎穿孔

3、法、腹腔注射酵母多糖與液體石蠟法）對(duì)大鼠血漿ET、腫瘤壞死因子（TNF-α）、IL-10含量進(jìn)行定量測(cè)定。用間苯三酚法檢測(cè)各組大鼠小腸對(duì)D-木糖的吸收功能，并觀察肺、小腸、肝、腎組織的病理形態(tài)學(xué)變化。 方法：SD大鼠40只，雌雄各半，體重180～220g。將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分成4組，每組10只。對(duì)照組、灌服熱性中藥與自身糞便組（簡(jiǎn)稱中藥組）、盲腸結(jié)扎穿孔組（簡(jiǎn)稱結(jié)扎組）、腹腔注射ZymosanA與無(wú)菌液體石蠟混懸液組（簡(jiǎn)稱注射組）。

4、中藥組：以附子、吳茱萸、干姜以1：1：1作水煎劑，20g/kg灌服12天后，禁食，100g/L自身糞便混懸液2ml灌胃，每天2次，連續(xù)2天，同時(shí)5%乙醇代水隨意飲用，每日更換，保證濃度。結(jié)扎組：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常飼養(yǎng)，每天灌服自來(lái)水20g/kg體重，連續(xù)14天。第15日以10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，取右下腹斜切口入腹，結(jié)扎盲腸根部，于距結(jié)扎線約0．5cm處以Sml注射器針頭穿孔并縫合切口，24h后取材。其他組僅開腹游離盲腸不做結(jié)扎穿孔后縫合

5、切口。注射組：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物正常飼養(yǎng)，每天灌服自來(lái)水20g/kg體重，連續(xù)14天。第15日以無(wú)菌ZymosanA粉劑與無(wú)菌液體石蠟制成混懸液，按1．0mg/g體重腹腔注射，24小時(shí)后取材，其他各組注射等量無(wú)菌液體石蠟。血漿D-木糖測(cè)定（間苯三酚法）：各組大鼠于處死前一小時(shí)先灌服50g/ID-木糖溶液0．3g/kg，1h后腹主動(dòng)脈取血，制備血漿，用間苯三酚法進(jìn)行檢測(cè)。血漿ET、腫瘤壞死因子（TNF-α）、IL-10均采用ELISA法檢測(cè)，下腔靜

6、脈取血，制備血漿嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明操作。處死大鼠后，取出肝、肺、腎、小腸，用生理鹽水沖洗干凈，制作病理切片，HE染色，光鏡觀察。 結(jié)果： 1．一般狀況：中藥組大鼠灌服熱性中藥3天后出現(xiàn)體重降低，豎毛，活動(dòng)增加，飲水量增加，尿量減少并發(fā)黃；灌自身糞便當(dāng)天出現(xiàn)排便時(shí)間延長(zhǎng)，排便粒數(shù)減少，大便干結(jié)，并成圓珠狀或串珠狀；其他組大鼠第15日前飲食，大便正常，毛發(fā)有色澤、行為狀態(tài)正常。 2．血漿ET含量：與對(duì)照組相比較，三個(gè)模

7、型組的血漿ET含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個(gè)模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 3．血漿TNF-α含量：與對(duì)照組相比較，三個(gè)模型組的血漿TNF-α含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個(gè)模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 4．血漿IL-10含量：與對(duì)照組相比較，三個(gè)模型組的血漿IL-10含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個(gè)模型組之間差異沒有顯著性（P>0．

8、05）。 5．D-木糖吸收率：與對(duì)照組相比較，三個(gè)模型組的血漿D-木糖含量均明顯升高，差異具有顯著性（P<0．05），三個(gè)模型組之間差異沒有顯著性（P>0．05）。 6．各組大鼠組織病理形態(tài)學(xué)變化：三個(gè)模型組大鼠的主要臟器（小腸、肝、肺、腎）均表現(xiàn)為明顯的炎性病理改變。 結(jié)論： 1．灌服熱性中藥與自身糞便法在各個(gè)檢測(cè)指標(biāo)上均達(dá)到以上提及的兩種造模方法的檢測(cè)結(jié)果，其造模原理更加符合中醫(yī)理論。 2．血