瞬時(shí)受體電位通道和神經(jīng)肽表達(dá)上調(diào)在甲醛誘導(dǎo)型支氣管哮喘小鼠模型中的作用.pdf

1、甲醛是一種常見(jiàn)的裝修型化學(xué)性室內(nèi)空氣污染物，也是一種全球性的環(huán)境污染物。它具有污染來(lái)源廣、時(shí)間長(zhǎng)、水平高、毒性種類多等特點(diǎn)。甲醛對(duì)健康的影響主要包括:呼吸道和眼部急性刺激作用、神經(jīng)行為改變、生殖毒性、免疫毒性、氧化損傷、遺傳毒性等諸多方面。近年來(lái)，世界各地哮喘發(fā)病率都在快速增長(zhǎng)，但致敏原的種類和數(shù)量并未發(fā)生顯著變化。非過(guò)敏原性空氣污染物的大量增加被認(rèn)為是原因之一，但其分子機(jī)制尚不清楚。不斷有研究表明，甲醛暴露可以引起哮喘或哮喘樣癥狀。為

2、了探討甲醛是否可以誘發(fā)哮喘和其可能的發(fā)病機(jī)理，本論文進(jìn)行了如下體內(nèi)研究:
　　1.甲醛導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)源性炎癥及氧化性損傷發(fā)生:對(duì)Balb/c小鼠連續(xù)甲醛氣態(tài)暴露7天，每天8小時(shí)，設(shè)(a)對(duì)照組;(b)0.5mg/m3甲醛組;(c)3.0mg/m3甲醛組，在3.0mg/m3水平甲醛作用下，與對(duì)照組相比較:(1)腦組織谷胱甘肽(GSH)含量呈極顯著性降低(p＜0.01)，脊髓組織GSH含量呈顯著性降低(p＜0.05);(2)腦組

3、織丙二醛(MDA)含量呈極顯著性增高(p＜0.01)，脊髓組織MDA含量呈顯著性增高(p＜0.05);(3)腦組織促炎癥細(xì)胞因子白介素-IL-1β含量呈顯著性增高(p＜0.05)，脊髓組織IL-1β含量呈極顯著性增高(p＜0.01);(4)腦組織速激肽物質(zhì)P含量(substanceP)呈極顯著增高(p＜0.01)，脊髓組織substanceP含量呈極顯著性增高(p＜0.01)。本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明甲醛可以導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)性炎癥及氧化損傷發(fā)生。

4、
　　2.TRPA1介導(dǎo)甲醛所致氣道炎癥發(fā)生:對(duì)Balb/c小鼠連續(xù)甲醛氣態(tài)暴露10天，每天8小時(shí)。設(shè)(a)對(duì)照組;(b)0.5mg/m3甲醛組;(c)1.0mg/m3甲醛組;(d)3.0mg/m3甲醛組;(e)3.0mg/m3+HC-030031[瞬時(shí)受體電位通道亞型A1(TRPA1)拮抗劑]組，發(fā)現(xiàn)在3.0mg/m3甲醛水平作用下，與對(duì)照組相比較:(1)血清中免疫球蛋白E(IgE)水平顯著上升(p＜0.01);(2)小鼠肺泡灌

5、洗液中白介素-4(IL-4)含量顯著上調(diào)(p＜0.01);(3)血清中超氧化物歧化酶(SOD)活力顯著下降(p＜0.01)，MDA含量顯著上升(p＜0.01);對(duì)3.0mg/m3甲醛給予HC-030031(50mg/kg)處理，發(fā)現(xiàn)IgE水平下調(diào)(p＜0.01)，IL-4水平下調(diào)(p＜0.01)，SOD活力上升(p＜0.05)，MDA含量下降(p＜0.05);本實(shí)驗(yàn)說(shuō)明TRPA1可以介導(dǎo)甲醛所致氣道炎癥發(fā)生和氧化損傷作用。
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6、.TRPA1和TRPV1通道蛋白介導(dǎo)氣態(tài)甲醛誘導(dǎo)哮喘作用:對(duì)Balb/c雄性小鼠甲醛動(dòng)態(tài)式氣態(tài)暴露4周，每天6小時(shí)，卵清蛋白(OVA)致敏并激發(fā)1周建立甲醛誘導(dǎo)哮喘模型。設(shè)(a)對(duì)照組;(b)OVA組;(c)3.0mg/m3甲醛組;(d)3.0mg/m3甲醛+OVA組;(e)3.0mg/m3甲醛+OVA+HC-030031組;(f)3.0mg/m3甲醛+OVA+capsazepine（瞬時(shí)受體電位通道亞型V1拮抗劑）組，分別測(cè)定氣道高反

7、應(yīng)性、氣道重塑、氣道炎癥相關(guān)指標(biāo)。與對(duì)照組相比，甲醛組氣道反應(yīng)性和肺部病理學(xué)變化并不明顯，但嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增高(p＜0.05)，血清總IgE含量明顯上調(diào)(p＜0.01)，IL-4含量顯著升高(p＜0.01)，substanceP表達(dá)上調(diào)(p＜0.01)，降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)表達(dá)上調(diào)(p＜0.05)，IL-1β水平升高(p＜0.01);與OVA組相比，甲醛+OVA組呈現(xiàn)顯著氣道高反應(yīng)性和氣道重塑現(xiàn)象，嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著增高

8、(p＜0.01)，血清中總IgE水平顯著上調(diào)(p＜0.01)，肺組織IL-4含量顯著升高(p＜0.01);substanceP表達(dá)上調(diào)(p＜0.01)、CGRP表達(dá)上調(diào)(p＜0.01)，IL-1β水平升高(p＜0.01)。對(duì)FA+OVA組給予TRPA1通道拮抗劑HC-030031和TRPV1通道拮抗劑CPZ，結(jié)果顯示:拮抗組與模型組相比，(1)氣道高反應(yīng)性顯著降低;(2)肺組織病理變化明顯好轉(zhuǎn);(3)小鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)降低

9、(p＜0.01)，肺組織IL-4含量顯著降低(p＜0.01)，血清中IgE水平降低(p＜0.01);(4)substanceP表達(dá)下調(diào)(p＜0.01)、CGRP表達(dá)下調(diào)(p＜0.05)，IL-1β水平無(wú)顯著變化(p＞0.05)。結(jié)果說(shuō)明甲醛可以提高哮喘的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，它可以直接導(dǎo)致神經(jīng)源性氣道炎癥，并以免疫佐劑身份加重OVA過(guò)敏原導(dǎo)致氣道炎癥;SubstanceP和CGRP參與甲醛誘導(dǎo)哮喘的病理生理過(guò)程，TRPA1和TRPV1通道蛋白介導(dǎo)氣