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1、本文探討了一種新的免疫避孕策略即:共免疫鼠卵透明帶3(mZP3)DNA和蛋白疫苗在保留高水平抗體的同時(shí),不僅能夠消除T細(xì)胞炎癥反應(yīng),而且造成小鼠生育率的顯著下降。共免疫不育疫苗的抗生育率達(dá)到了70%(從naive小鼠的100%下降到了30%),其它各組抗生育率在40%-60%之間??贵w分析顯示,共免疫組的抗體水平達(dá)到了最高。在共免疫組,不孕小鼠和生育小鼠抗體水平的差異是顯著的,高水平的抗體反應(yīng)和生育率的下降是呈正相關(guān)的;然而,其它各組生
2、育率下降和抗體水平之間沒(méi)有相關(guān)性。 組織學(xué)分析顯示,在共免疫組的不孕小鼠卵巢中呈現(xiàn)出正常的卵泡發(fā)育,而其它各免疫組的大部分不孕小鼠卵巢缺少成熟的卵泡,這可能是造成這些小鼠不孕的原因。在共免疫小鼠中,正常卵泡發(fā)育和T細(xì)胞反應(yīng)的抑制之間具有明顯的相關(guān)性;同時(shí),共免疫可減少炎癥細(xì)胞因子IFN-Y的表達(dá),增加lL-1 Q和FoxP3的表達(dá),揭示這種抗炎癥反應(yīng)可能是調(diào)節(jié)性T細(xì)胞介導(dǎo)的。 由于調(diào)節(jié)性T細(xì)胞能夠抑制免疫反應(yīng)和維持對(duì)自身
3、抗原的免疫耐受,DNA疫苗和蛋白疫苗共免疫誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞能夠調(diào)控病理性T細(xì)胞反應(yīng),使得共免疫小鼠避免了異常的卵泡發(fā)育,我們以卵巢自主免疫疾病(autoimmuneovarian disease: AOD)作為研究模型來(lái)探討這類(lèi)調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的特征及作用機(jī)理。ZP3蛋白抗原引起的自主免疫反應(yīng)是AOD的重要誘因原因之一。用mZP3蛋白和完全弗氏佐劑誘導(dǎo)的AOD小鼠模型,我們探討了采用共免疫的方法來(lái)治療AOD的可行性。研究結(jié)果顯示,共免疫m
4、ZP3 DNA和蛋白疫苗顯著減輕了AOD的發(fā)病程度,并且抑制了抗原特異性的T細(xì)胞反應(yīng),降低了炎癥因子IL-12和INF-Y的表達(dá)水平,這些作用可能是由于共免疫誘導(dǎo)出了一群特異性的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞來(lái)完成的。這群調(diào)節(jié)性T細(xì)胞高表達(dá)lL-10和FoxP3。在第一次共免疫的同時(shí),將抗CD25的抗體同時(shí)注射到小鼠體內(nèi),抗VP1的抗體作為無(wú)關(guān)抗體對(duì)照。結(jié)果顯示,抗CD25的抗體沒(méi)有影響共免疫的治療效果;同時(shí),與其它各組相比,共免疫小鼠脾臟和淋巴結(jié)的CD
5、4<'+>T細(xì)胞CD25的表達(dá)沒(méi)有發(fā)生變化,這群調(diào)節(jié)性T細(xì)胞可能不屬于CD25<'+>。將CD4<'+>CD25<'->和CD4<'+>CD25<'+>細(xì)胞從共免疫和錯(cuò)配免疫的小鼠中分離純化出來(lái),通過(guò)尾靜脈過(guò)繼轉(zhuǎn)移到發(fā)病小鼠體內(nèi),發(fā)現(xiàn)只有從共免疫來(lái)源的CD4<'+>CD25<'->細(xì)胞才能治療AOD。將純化的上述細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞因子表達(dá)檢測(cè),結(jié)果顯示,只有CD4<'+>CD25<'->。細(xì)胞的IL-10和FoxP3的表達(dá)顯著增加。這些結(jié)果說(shuō)
6、明,共免疫誘導(dǎo)了調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,并且這群調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的特征是CD4<'+>/CD25<'->/FoxP3<'+>,并能表達(dá)lL-10。嘗試了采用共免疫DNA和蛋白疫苗的方法來(lái)治療自主免疫疾病。總之,本研究證明了mZP3 DNA疫苗和蛋白疫苗共免疫顯著降低了小鼠的生育率。這種方法不僅誘導(dǎo)了最高水平的抗體反應(yīng),也抑制T細(xì)胞反應(yīng),避免了病理性T細(xì)胞反應(yīng)對(duì)卵巢造成的傷害。病理性T細(xì)胞反應(yīng)的抑制與共免疫誘導(dǎo)的CD4<'+>CD25<'->調(diào)節(jié)性T細(xì)
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