富血小板血漿復(fù)合珊瑚修復(fù)下頜骨缺損的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 本實(shí)驗(yàn)通過將濱珊瑚與富血小板血漿(Platelet-RichPlasma，PRP)復(fù)合修復(fù)兔下頜骨缺損，并以濱珊瑚與貧血小板血漿(Platelet-PoorPlasma，PPP)復(fù)合作為對照，分析PRP對骨缺損修復(fù)的作用及濱珊瑚與富血小板血漿復(fù)合后修復(fù)兔下頜骨缺損的效果，為臨床應(yīng)用提供參考。 方法： 1、PRP及PPP的制備：選用24只成年新西蘭兔，每只動(dòng)物采集5ml全血，通過兩步離心法：第一次將全血離心24

2、00轉(zhuǎn)/分鐘，離心10分鐘后獲取上清液和血小板層；再將上清液與血小板層進(jìn)行第二次離心3600轉(zhuǎn)/分鐘，10分鐘，制備PRP及PPP各0.8ml(制備的PRP平均血小板計(jì)數(shù)為1070×103/μl；制備的PPP平均血小板計(jì)數(shù)為15×103/μl)。 2、手術(shù)步驟：在動(dòng)物雙側(cè)下頜骨體處制作大小15mm×5×4mm洞穿骨缺損，隨機(jī)選擇左側(cè)為實(shí)驗(yàn)側(cè)，右側(cè)為對照側(cè)。將制備好的PRP及PPP分別與500μ凝血酶、0.5ml10％氯化鈣及15

3、g制備好的濱珊瑚顆粒混合，制成膠狀復(fù)合物。將濱珊瑚/PRP復(fù)合物植入實(shí)驗(yàn)側(cè)骨缺損區(qū)，濱珊瑚/PPP復(fù)合物植入對照側(cè)骨缺損區(qū)。 3、檢測指標(biāo)：術(shù)后第2、4、8周時(shí)，每次隨機(jī)選擇6只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采用放射性核素骨顯像檢測每只動(dòng)物雙側(cè)骨缺損區(qū)的放射性計(jì)數(shù)。之后，將動(dòng)物處死，取出雙側(cè)骨缺損區(qū)標(biāo)本進(jìn)行大體、影像學(xué)、組織學(xué)觀察及組織學(xué)計(jì)量檢測。術(shù)后12周，將剩余動(dòng)物全部處死，行大體、影像學(xué)、組織學(xué)觀察。 結(jié)果： 1、放射性核素顯

4、像結(jié)果：術(shù)后第2、4周被檢動(dòng)物骨缺損區(qū)顯示出較高核素濃集。第2周時(shí)，實(shí)驗(yàn)側(cè)與對照側(cè)相比，核素計(jì)數(shù)差異有顯著意義(P＜0.05)。而在第4、8周，雖然實(shí)驗(yàn)側(cè)比對照側(cè)有更高的核素濃集，但統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，差異沒有顯著意義(P＞0.05)。 2、標(biāo)本大體觀察顯示在新骨形成速度方面，對照側(cè)落后于實(shí)驗(yàn)側(cè)。術(shù)后第12周時(shí)實(shí)驗(yàn)側(cè)骨缺損區(qū)已被完全修復(fù)，而對照側(cè)仍可見部分區(qū)域未完全修復(fù)。 3、X線觀察：術(shù)后2周實(shí)驗(yàn)側(cè)缺損區(qū)邊緣出現(xiàn)少量模糊云霧狀

5、致密影，4周時(shí)缺損區(qū)的邊緣及中央?yún)^(qū)域出現(xiàn)骨痂影像，8周時(shí)骨痂影像面積增大密度增高，至12周時(shí)缺損區(qū)已充滿骨痂影。對照側(cè)4周時(shí)缺損邊緣區(qū)出現(xiàn)點(diǎn)狀骨痂影，8周時(shí)逐漸匯合成片狀，但材料中央仍見較低密度影，至12周時(shí)缺損區(qū)密度增高，但仍略低于實(shí)驗(yàn)側(cè)。 4、組織學(xué)觀察和計(jì)量分析：在新骨形成過程中，實(shí)驗(yàn)側(cè)和對照側(cè)在缺損區(qū)均可見大量纖維組織生長，在材料區(qū)中央及材料與宿主骨交界面可以看到新骨形成及改建。術(shù)后第2、4周和第8周，實(shí)驗(yàn)側(cè)材料區(qū)比較對

6、照側(cè)可以看到更多的梭形細(xì)胞(未分化間充質(zhì)細(xì)胞或成纖維細(xì)胞)和成骨細(xì)胞，并且有更多的新生骨形成，新生骨量的對比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。術(shù)后第12周，兩側(cè)缺損區(qū)植骨床生長沒有區(qū)別，均見到成熟的大片骨組織，出現(xiàn)皮質(zhì)骨和骨髓腔，已分化成致密的皮質(zhì)骨和骨髓腔。 結(jié)論： 1、PRP與濱珊瑚復(fù)合后能顯著促進(jìn)兔下頜骨缺損的修復(fù)。 2、PRP能起到很好的促進(jìn)骨生長的效果，其效應(yīng)體現(xiàn)在其對成骨相關(guān)細(xì)胞具有趨化和促進(jìn)增殖、分化作