不同濃度凝血酶對(duì)富血小板血漿促顱骨缺損修復(fù)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究不同濃度凝血酶對(duì)富血小板血漿(PRP)促骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖作用的影響，得出促細(xì)胞增殖作用的最佳凝血酶濃度，并與常用凝血酶濃度1000U/ml比較，觀察不同濃度凝血酶對(duì)PRP修復(fù)顱骨缺損的影響。 方法：1.抽取新西蘭兔全血制取PRP，按PRP與凝血酶9∶1(v/v)加入下列濃度的凝血酶：20U/ml、40U/ml、60U/ml、80U/ml、100U/ml、500U/ml和1000U/ml，制取復(fù)合生長(zhǎng)因子；抽取同只新西蘭

2、兔骨髓，在體外培養(yǎng)擴(kuò)增，取生長(zhǎng)良好的第三代骨髓基質(zhì)細(xì)胞，1×104個(gè)細(xì)胞/孔植入96孔板中，加入含前述生長(zhǎng)因子的10％胎牛血清(FBS)的DMEM液、10％FBS的DMEM液(陽(yáng)性對(duì)照組)及無(wú)血清的DMEM液(陰性對(duì)照組)，用MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況，得出促細(xì)胞增殖的最佳凝血酶濃度A。2.分別在16只新西蘭兔顱骨頂部制備4個(gè)直徑為8mm的全厚層骨缺損，按隨機(jī)法采用：1000U/ml濃度凝血酶+PRP+β-TCP、A凝血酶+PRP+β-T

3、CP、PRP+β-TCP、β-TCP(空白)等治療修復(fù)，分別于術(shù)后1個(gè)月和3個(gè)月取標(biāo)本，用組織病理學(xué)法觀察顱骨修復(fù)情況。 結(jié)果：1.不同濃度凝血酶激活的PRP均能促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞的增殖，作用明顯優(yōu)于對(duì)照組(P＜0.05)，20U/ml～60U/ml時(shí)呈濃度依賴(lài)關(guān)系，60U/ml為最佳濃度。2.不同濃度凝血酶激活的PRP修復(fù)顱骨缺損情況：術(shù)后1個(gè)月各組新骨生成百分?jǐn)?shù)：1000U/ml組為20.43±2.28％、60U/ml組為21

4、.26±1.41％、單純PRP組為21.05±3.42％、空白組為17.33±3.15％；術(shù)后3個(gè)月各組新骨生成百分?jǐn)?shù)：1000U/ml組為36.29±4.01％、60U/ml組為35.89±3.65％、單純PRP組為42.61±4.86％、空白組為31.57±4.02％。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析結(jié)果顯示：術(shù)后1個(gè)月PRP各組新骨生成百分?jǐn)?shù)均高于空白組(P＜0.05)，但PRP三組間差別無(wú)顯著性；術(shù)后3個(gè)月PRP各組新骨生成百分?jǐn)?shù)亦高于空白組(P＜0